Bioquimica Segundo Parcial Reporte 2

Universidad de Guayaquil
Facultad de Ciencias Naturales
Escuela de Biología
Bioquímica
2º Parcial
Practica N° 2
Propiedades y Reconocimiento de Proteínas.
Objetivo
Determinar y caracterizar las propiedades de las proteínas.
Introducción:
Desde el punto de vista de su composición elemental todas las proteínas contienen carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno, mientras que casi todas contienenademás azufre (Cabe resaltar que en azúcares y lípidos el nitrógeno sólo aparece en algunos de ellos). Hay otros elementos que aparecen solamente en algunas proteínas (fósforo, cobre, zinc, hierro, etc.).

Las proteínas son cadenas de aminoácidos que se pliegan adquiriendo una estructura tridimensional que les permite llevar a cabo miles de funciones. Las proteínas están codificadas en el materialgenético de cada organismo, donde se especifica su secuencia de aminoácidos, y luego son sintetizadas por los ribosomas. Las proteínas desempeñan un papel fundamental en los seres vivos y son las biomoléculas más versátiles y más diversas. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre ellas funciones estructurales, enzimáticas, transportadora.

Las proteínas son biomoléculasformadas básicamente por carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno. Pueden además contener azufre y en algunos tipos de proteínas, fósforo, hierro, magnesio y cobre entre otros elementos. Pueden considerarse polímeros de unas pequeñas moléculas que reciben el nombre de aminoácidos y serían, por tanto, las monómeras unidades. Los aminoácidos están unidos mediante enlaces peptídicos. La unión de un bajonúmero de aminoácidos da lugar a un péptido; si el número de aminoácidos que forma la molécula no es mayor de 10, se denomina oligopéptido, si es superior a 10 se llama polipéptido y si el número es superior a 50 aminoácidos se habla ya de proteína.

Reactivos y Materiales:
· Solución de Ác. Acético 0.1 M
· Solución de Acetato de Sodio 0.1 M
· Etanol de 96%
· Solución de gelatina al 1%
· Pipetasserológicas 1, 2, 5 y 10 ml ( 2 de cada una por grupo)
· Tubos de ensayo 150 x 16 (6 por grupo)
· Gradillas o porta tubos (3 unidades)
· Marcadores a prueba de agua y calor
· Auxiliares de micropipeta



Metodología:
Desnaturalización de albumina con ácidos y bases fuertes:
Se preparó 3 mL de H2SO4 con 1 mL de muestras problema, igualmente se hizo con los reactivos HNO3 y el NaOH. (Ácidos fuertes yalcalinos). Se agito los tubos y se observó si se presenta solubilidad.
Desnaturalización con metales pesados
Se preparó 1 mL de Cloruro de mercurio con 2 mL de las muestras problema igualmente se hizo con Nitrato de plata. Se agito los tubos de ensayo con los reactivos y se vio que se solubilizaron.
Desnaturalización con Ácido Pícrico y Tricloroacetico
Se agregó 1 mL de ácido Pícrico con 2 mL delas muestras problema en los tubos de ensayo. Se hizo lo mismo con el Ácido Ticloroacetico. Se calentó a baño María por 5 min y después se los dejo enfriar por 5 min más y se realizó las observaciones a cada tubo.
Reconocimiento de proteínas
El reactivo de Biurt contiene CuSO4 en solución acuosa alcalina (gracias a la presencia de NaOH o KOH). La reacción se basa en la formación de un compuestode color violeta, debido a la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos.
Reactivo de Biuret
Solución de NaOH al 40% (Bluret A): 50 mL
Solución de CuSO4 – 5H2O al 1% (Bluret B): 50 mL
Preparación de tubos de ensayo limpios
Tubo 1 3 mL Albumina
Tubo 2 3 mL Caseína
Tubo 33 mL Gelatina
Tubo 4 3 mL clara de huevo
Procedimiento

numerar 5 tubos del 1 – 5 y proceder a medir las siguientes soluciones.
Mezclar adecuadamente cada uno de los tubos a fin de obtener soluciones homogéneas.
1. A cada uno de los tubos adicionar 1-2 ml de gelatina y mezclar bien.
2. Al tubo 4 con una pipeta adicionar lentamente y por las paredes del tubo una cantidad de etanol de 96%,...