Bioquimica Y El Adn

INTRODUCCION

El ADN o Acido Desoxirribonucleico es una macromolécula orgánica que forma parte de todas las células de todos los seres vivos. Es uno de los dos ácidos nucleicos que existen, contiene la información genética de los organismo y de algunos virus; siendo responsable de transmitir esta información a sus descendientes. Desde un punto de vista químico el ADN es un polinucleótido, estoquiere decir, que esta formado por nucleótido, y cada nucleótido, a su vez, está formado por un azúcar (la desoxirribosa), una base nitrogenada (que puede ser adenina→A, timina→T, citosina→C o guanina→G) y un grupo fosfato.
Uno de los aspectos más importantes en el aislamiento de ácidos nucleicos es la prevención de su degradación durante el procedimiento de extracción. Esto es aun más importantecuando se requiere extraer RNA. Durante el procesamiento y metabolismo de RNA en las células ocurre de manera normal rompimiento y degradación de moléculas de RNA gracias a que las células poseen una amplia variedad de nucleasas con actividad especifica y no especifica.
Debido a la amplia distribución de nucleasas y al daño potencial que pueden ocasionar durante el aislamiento de RNA, esimportante asegurar que la actividad de estas enzimas sea inhibida totalmente. Una buena preparación de ácidos nucleicos totales o RNA es indispensable para su posterior utilización en diversas técnicas de análisis molecular.

Objetivo: El alumno debe de tener clara la manera en que se forma la doble hélice de Watson, crick, y cuales son sus características.

Material:
* Primera parte:
Cubapara hielo
Vaso de precipitado s de 600ml
Vaso de precipitados de 100ml
Probeta de 50 a 100ml
Erlenmeyer de 250ml con tapón.
Mechero, Tripie y tela de asbesto.

* Segunda parte:
Cuba para hielo
10 tubos de ensaye de 18x150
Vaso de precipitado s de 250ml
2 pipetas de 5ml
Pipeta de 1ml
Gradilla
Mechero, Tripie y tela de asbesto.
Escobetilla.

Procedimiento:
Primera parte:Aislamiento de ácidos nucleídos:
1.-Preparamos un recipiente con hielo, suficiente grande y pusimos el vaso precipitado de 100ml sumergido en el hielo. Enfriamos también 40ml de cloruro de sodio 10% colocados en su erlenmeyer de 250ml.
2.-Asi mismo con el mechero, en un vaso de 600ml preparamos un baño de agua hirviendo no llene todo el vaso y usamos agua destilada.
3.-Pese a 10 o 15 gramos de hígadode res.
4.-Cortamos el hígado con tijeras, cuchillo o navaja en fragmentos lo mas pequeños posible y viértalos directamente al vaso de precipitados de 600ml que esta en el baño de hielo.
5.-Añada al vaso de precipitados los 40ml de cloruro de sodio al 10%. Viértalo todo a la licuadora.
6.-Conecte la licuadora y homogenice el hígado por 30segundos vierta el homogéneo a una probeta para medir elvolumen obtenido.
7.-Vierta el homogéneo al erlenmeyer de 250ml. Tápelo sin apretar y llévelo al baño de agua hirviendo. Dejarlo 30minutos.
8.-Filtramos la suspensión caliente a través de fibra de vidrio hacia una probeta para medir el volumen de filtrado obtenido. Deje que se enfrié lo grueso queda en la fibra de vidrio descarta.
9.-Pase al filtrado a un vaso de precipitados de 100ml y añada2.5 volúmenes de etanol de 95% (por ejemplo si se obtuvieron 20 ml de filtrado, se añadieran 50ml de etanol) Mezcle bien y deje reposar por 10minutos. Los ácidos nucleídos se sedimentan.
10.-Decante lo mas posible de la solución sobrenadante sin dejar que se vaya ningún solido y luego lo filtramos.
11.-Lave el precipitado en el mismo papel filtro, primero con 10ml de alcohol 95% y luego 10ml deéter etílico agregándolos despacio. Dejar el precipitado al aire.
12.-Transferimos el precipitado a un tubo de ensaye de 18x150 añada 4ml de hidróxido de sodio 1.0N. Suspenda bien el siguiente sesión de laboratorio.
13.-Anote sus resultados y observaciones en la hoja de datos, el procedimiento que acaba de terminar es:
Aislamiento de todos los ácidos nucleídos.

-Segunda parte:
1.-Prepare...