Bioquimica
Determinar fotocolorimétricamente la concentración de proteínas de una muestra sérica, usando una curva estándar.
MATERIALES:
Espectrómetro
Baño María.
REACTIVOS:
Soluciónpatrón de proteínas (8mg de albumina/ ml).
Solución de NaCl 0-9% (p/v).
Reactivo de biuret.
Muestra sérica.
PROCEDIMIENTO:
1. Llene 6 tubos de ensayo de la manera siguiente:
TUBO | 1(blanco)| 2 | 3 | 4 | 5 | 6 Muestra sérica |
Muestra sérica ( ml) | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 1,00 |
Patrón de prot. | 0,00 | 0,25 | 0,50 | 0,75 | 1,00 | 0,00 |
Agua (ml) | 3,00 | 2,75 | 2,50| 2,25 | 2,00 | 2,00 |
biuret | 3,00 | 3,00 | 3,00 | 3,00 | 3,00 | 3,00 |
2. Caliente los tubos en el baño (50°) durante 10 minutos.
3. Enfrié los tubos en agua corriente.
4.Determine en el espectofometro la absorbancia a 540nm; ajuste a cero con el blanco (tubo no.1).
5. Dibuje la curva patrón (absorbancia vs concentración de proteína).
6. Determine la concentraciónproteína (mg/ ml) de la solución problema interpolando la curva patrón.
CUESTIONARIO:
1. ¿Cuál es el rango de valores de proteínas en una muestra sérica?
2. ¿Por qué se utiliza el reactivode biuret en esta práctica?
3. ¿Cuál es la utilidad de saber la concentración de proteínas en una muestra sérica?
RESULTADO:
INTRODUCCION
En este trabajo se presentan losresultados obtenidos en la determinación de proteína sérica total y de las fracciones, albúmina, alfa, beta y gamma globulinas separadas por precipitación con soluciones de sulfato de sodio yestimadas colorimétricamente por medio del reactivo de biuret. Estos estudios incluyen grupos normales de población de la Ciudad de Guatemala, así como mujeres embarazadas "normales" y un pequeño grupo deembarazadas que presentaran un cuadro sintomático de preeclampsia. Las cifras finales concuerdan con las obtenidas previamente por el método electroforético.
Las proteínas son compuestos a base de...
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