Bioquimica

INHIBIDORES
• Moléculas que disminuyen la V de reacción enzimática
Afectan a la cinética de reacción al interferir con:

INHIBICIÓN ENZIMÁTICA

- La formación del complejo ES
- Con su disociación

TEMA 11

- Con ambos procesos a la vez
• Existen varios mecanismos. Veremos los efectos
que producen sobre Enzimas de cinética M-M

TIPOS DE INHIBICIÓN

Inhibiciones reversiblesInhibiciones irreversibles

1.- INHIBICIÓN COMPETITIVA
2.- INHIBICIÓN NO COMPETITIVA
3.- INHIBICIÓN ACOMPETITIVA Ó INCOMPETITIVA
4.- INHIBICIÓN POR SUSTRATO

• Unión no covalente del I,
no altera la estructura del
E. Al desaparecer, se
recupera la actividad
catalítica

• Unión covalente del
I, altera la estructura
del E de forma
definitiva

•Tipos 1; 2; 3

1

InhibiciónReversible (IR)

La IR puede afectar a Vmax ó Km ó a ambas a la vez

1.- INHIBICIÓN COMPETITIVA.

Si sólo afecta Km

IR Competitiva

• El I compite directamente con un sustrato por un
sitio de fijación enzimático ( centro activo del E)

Si sólo afecta Vmax

IR No-Competitiva

• Se parece al S ( forma y tamaño similares = isóstero)

Si afecta tanto a Km y a Vmax

IR Acompetitiva
IRMixta

• No es reactivo ( si lo fuera sería un S alternativo
competitivo)

1.- INHIBICIÓN COMPETITIVA.

Modelo General
A. Compitiendo con el sustrato por
el sitio de unión al centro activo

S
Enzima

E +S

ES

E+P

+

S

I
Ki

I

Enzima no activa

Ki ´
EI

+S

No hay
reacción

2

B. Modificando la conformación del centro activo

El grado de inhibicióncompetitiva depende de la
fracción de E que se una al I

de modo que impida la unión del sustrato

K1

E +S

K2

+

K3

E+P

I

S

Ki ´

Ki

Enzima

No hay
reacción
I se une de forma reversible al E y está rápidamente en
equilibrio con ella
EI es catalíticamente inactivo

I

EI

S
Enzima no activa

KI =

• La v de formación EI será igual a la v dedescomposición
[E] [I]
en el
KI =
Ki= [I] [E]= Ki´[EI]
KI= Ki´/ Ki
equilibrio
[EI]

• Puede ser superada a >> [S]
• El I competitivo ↑ valor aparente de Km : para
obtener la misma v de reacción se necesita > [S]
α=1+

[I] es la concentración de inhibidor
KI es la cte de disociación para el complejo EI
Km ap es la Km observada en presencia de I

[E] [I]
[EI]

+S

KI es la cte dedisociación o cte de
equilibrio de fijación de I a E

Inhibidor competitivo reduce la concentración de
E libre disponible para la unión del sustrato
Ecuación de Michaelis- Menten para reacción
inhibida competitivamente

cte de disociación

• Inhibición mas potente cuanto < KI

Km ap = Km (1 + [I]/KI)

ES

Se deduce como antes (M-M) pero con un término
adicional que representa la fracción de[E]T que une a I
para formar EI
[E]T = [E] + [ES] + [EI]

[I]
KI
V0 =

Vmáx [S]
α Km + [S]

α=1+

resulta
[I]
KI

α Km = Kmap

3

1.- INHIBICIÓN COMPETITIVA.

Reacción de M-M

V0versus [S] en presencia de diferentes concentraciones de I
Valores crecientes de α

α , una función de concentración del I y su
afinidad por el E no puede ser < 1
Presencia de I hace que [S]parezca menor de lo que es
en realidad. Hace que Km parezca mayor de lo que es
en realidad como consecuencia de que la unión de I y
S al E es mutuamente excluyente
El aumento de [S] puede superar al I competitivo
α es el factor por el que [S] debe aumentar
para superar el efecto de la presencia del I
V0 ~ Vmáx para cualquier valor de α
(cualquier concentración del I)
El I no afecta el nºde recambio del E
Cuando [S] ~ ∞ ;

Gráfico Lineweaver-Burk

KI puede medirse

Vmax= Kcat [ET]

Vmáx [S]
V0 =

1
=
V0

Transformación en doble recíproca

α Km + [S]
α Km

1

Vmáx

[S]

+

1

α= 1 +

Vmáx

[I]
KI

Corresponde a gráfico de ecuación de una recta:
- Pendiente es α Km / Vmáx
- Intersección en el eje 1/[S] es – 1 / α Km
- Intersección en el...