bioquimica

CÁTEDRA DE BIOLOGÍA

Apunte Teórico:

MICROSCOPÍA

2007
Dra. Ofelia Naab
Ing. Agr. Carmen Torroba
Lic. Valeria Caramuti

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MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO
Un microscopio óptico es un instrumento que consiste básicamente en un tubo
con lentes de aumento en ambos extremos.
El objeto a observar es atravesado con luz visible, que es refractada por las
lentes del microscopio y así seamplifica la imagen.
Permite visualizar estructuras pequeñas, cuyas dimensiones son inferiores al
límite del poder de resolución del ojo humano.
Un microscopio óptico tiene dos características fundamentales:
1. la amplificación (aumento)
2. el poder de resolución, que a su vez depende de:
a. la calidad de las lentes
b. la longitud de onda de la luz que ilumina
Poder de resolución es lacapacidad de separar dos puntos muy próximos y dar
de ellos imágenes claras y definidas. El del ojo humano es de 100µm y el de un
microscopio óptico es de 0.24µm.
En los microscopios ópticos el material biológico a examinar se observa por
transparencia, significa que la luz debe atravesar los tejidos para formar imágenes. La
consecuencia de esto es que se hace necesario estudiar:
- célulasaplanadas sobre la superficie de un vidrio o,
- finos cortes de tejidos suficientemente delgados como para ser atravesados
por radiación luminosa.
La gran mayoría de los componentes celulares no tienen color debido al gran
contenido de agua. Esto plantea la necesidad del uso de colorantes selectivos, los cuales
presentan a la vez la dificultad de matar a las células, ya que previamente los tejidosdeben ser fijados, deshidratados, incluidos en un material endurecible y cortados.
Un microscopio óptico consta de una parte mecánica, una parte óptica y un
sistema de iluminación:
1) Parte mecánica:
Consta del pie, la columna o brazo, la platina, el tubo y los tornillos macrométrico y
micrométrico.
− El pie se encuentra en la base, suele tener forma de herradura y en él descansa el
restodel microscopio.
− La columna o brazo, ubicada sobre el pie, sirve de soporte a los demás accesorios y
debe tomarse de la misma cuando se desea trasladar el microscopio.
− La platina, ubicada en la parte media, de forma cuadrada o rectangular, soporta la
preparación y presenta un orificio en el centro que permite el paso de la luz; una
pinza de sujeción para el preparado y sobrepuesta a ellauna platina mecánica que
permite mover la preparación a voluntad en dos direcciones (llamadas Norte-Sur y
Este-Oeste), mediante el movimiento de tornillos ortogonales ubicados sobre la
platina o pendientes de ella. Estos tornillos pueden funcionar independientemente o
ser de comando coaxial (estar sobre el mismo eje). La mayor parte de las platinas
presentan una escala y un nonio quefacilitan la señalización de posiciones
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determinadas en la preparación. La escala presenta líneas marcadas a un milímetro
de distancia. El nonio es una escala corta que presenta 10 líneas divisorias que se
corresponden con 9 divisiones de la escala principal.
− El tubo sostiene al sistema óptico. En su parte superior se ubican las lentes oculares
que pueden ser una (en los microscopiosmonoculares) o dos (en los microscopios
binoculares). En su extremo inferior se ubica el revólver, que es una placa giratoria
que sostiene las lentes objetivos de distintos aumentos que pueden cambiarse al
girar el revólver.
− Los tornillos macrométrico y micrométrico se utilizan para efectuar el enfoque
movilizando el tubo o la platina según el tipo de microscopio. El primero efectúa un
ajusterápido y grosero, y el segundo realiza un ajuste lento y preciso. Ambos
tornillos pueden estar separados o bien ser coaxiales (dispuestos sobre un mismo
eje).
2) Parte óptica:
Consta de las lentes oculares, los objetivos y el condensador.
- Objetivos:
Cada objetivo consiste en un conjunto de lentes que en realidad cumplen la
función de una sola. Este sistema sirve para corregir errores de...