Bioquimica
Páginas: 7 (1577 palabras)
Publicado: 6 de mayo de 2012
PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATOLICA DE CHILE
FACULTAD DE QUIMICA
INFORME DE LABORATORIO
BIOQUIMICA
AISLACION Y PROPIEDADES QUIMICAS DE LA HEMOGLOBINA
EDMUNDO ANDRES MEÑIQUE
12 DE ABRIL DE 2005
Introducción
La hemoglobina es una proteína de la sangre encargada de irrigar los tejidos, transporta eloxígeno desde los pulmones hacia los tejidos y transporta el bióxido de carbono desde los tejidos hacia los pulmones. Esta proteína es tetramérica conjugada donde cada unidad esta formada por un grupo heme rodeado por una cadena polipeptídica. El grupo heme se compone de un átomo de Fe2+ centrado en una molécula de porfirina, así la hemoglobina a través de sus cuatro átomos de Fe2+ que tiene presenteen su interior es activada para la fijación de la molécula de oxígeno y transportarla por la sangre para las funciones específicas.
La hemoglobina puede tener cambios estructurales debido a la unión de determinados grupos moleculares a su estructura, llamándose oxihemoglobina por la unión de O2, nitrosilhemoglobina por la unión de NO, carboxihemoglobina por la unión de CO, y cuando el átomo deFe3+ está presente (en vez del átomo de Fe2+) junto con agua se forma la metahemoglobina.
En esta práctica gracias a una determinada muestra de sangre sintetizaremos la oxihemoglobina, y a partir de dicha oxihemoglobina identificaremos la metahemoglobina, la cual puede tener propiedades nocivas.
Objetivos:
- Preparar una solución de oxihemoglobina.
- Analizar la estructura ycomportamiento de la hemoglobina frente a diferentes sustancias como nitrito, monóxido de carbono, etc.
- Observar y analizar el efecto que produce la concentración en una solución sanguínea
- Obtener las absorbancias para las distintas especies de hemoglobina preparadas a partir de oxihemoglobina (desoxihemoglobina, nitrosilhemoglobina, metahemoglobina y oxihemoglobina)
- Someter la muestrapreparada de metahemoglobina a una columna de exclusión
Resultados
1. El test de efecto de la concentración salina se realizó con células lavadas en 9 tubos de ensayos distintos cada uno con las siguientes características:
Tubo 1 2 3 4 5 6 7 8 9
% NaCl 0 0.6 0.8 1.0 2.0 6.0 10 16 20
VNaCl 20% (ml) 0 0.3 0.4 0.5 1.0 3.0 5.0 8.0 10
V Agua (ml) 10 9.7 9.6 9.5 9.0 7.05.0 2.0 0
Gotas de células 2 2 2 2 2 2 2 2 2
Al finalizar el tiempo de espera del test se observó lo siguiente:
El tubo 1: tenía un color rojo-naranjo y no se observó precipitado.
El tubo 2: tenía un color relativamente naranjo y con un poco de precipitado.
El tubo 3: tenía color naranjo muy tenue y con más precipitado que el segundo.
El tubo 4: se notaba más bien incolora y conteníamayor precipitado.
El tubo 5: incoloro y aún más precipitado.
El tubo 6: también se notaba incolora pero con cierto color anaranjado y con menos precipitado (similar al tubo) 4.
El tubo 7: se aprecia un color levemente naranjo y turbio, con precipitado mayor que el tubo 8 y 9.
El tubo 8: el color naranjo se notó más que en el tubo 8 y con menos precipitado, pero mayor que el tubo 9.
El tubo9: se acercaba más al color rojo-naranjo como en el tubo 1 y con muy poco precipitado.
En general los tubos se pueden clasificar en grupos de a 3 debido a que eran bastante similares: 1-2-3 con apariencia de solución hipotónica, 4-5-6 con apariencia isotónica y 7-8-9 con apariencia hipertónica. Se puede decir que entre el tubo 1 y el 9 se observó el cambió de hipotonicidad a hipertonicidad.2. Los espectros de absorción de las diferentes especies de hemoglobina arrojaron los siguientes resultados:
Espectros de
Absorción Absorbancia
Experimental (nm) Absorbancia
Descrita (nm)
Oxihemoglobina 541 - 576 540 - 574
Desoxihemoglobina 554 555
Nitrisilhemoglobina 546 - 573 545 - 565
Metahemoglobina 498 - 633 500 - 630
También existieron principalmente en el...
FACULTAD DE QUIMICA
INFORME DE LABORATORIO
BIOQUIMICA
AISLACION Y PROPIEDADES QUIMICAS DE LA HEMOGLOBINA
EDMUNDO ANDRES MEÑIQUE
12 DE ABRIL DE 2005
Introducción
La hemoglobina es una proteína de la sangre encargada de irrigar los tejidos, transporta eloxígeno desde los pulmones hacia los tejidos y transporta el bióxido de carbono desde los tejidos hacia los pulmones. Esta proteína es tetramérica conjugada donde cada unidad esta formada por un grupo heme rodeado por una cadena polipeptídica. El grupo heme se compone de un átomo de Fe2+ centrado en una molécula de porfirina, así la hemoglobina a través de sus cuatro átomos de Fe2+ que tiene presenteen su interior es activada para la fijación de la molécula de oxígeno y transportarla por la sangre para las funciones específicas.
La hemoglobina puede tener cambios estructurales debido a la unión de determinados grupos moleculares a su estructura, llamándose oxihemoglobina por la unión de O2, nitrosilhemoglobina por la unión de NO, carboxihemoglobina por la unión de CO, y cuando el átomo deFe3+ está presente (en vez del átomo de Fe2+) junto con agua se forma la metahemoglobina.
En esta práctica gracias a una determinada muestra de sangre sintetizaremos la oxihemoglobina, y a partir de dicha oxihemoglobina identificaremos la metahemoglobina, la cual puede tener propiedades nocivas.
Objetivos:
- Preparar una solución de oxihemoglobina.
- Analizar la estructura ycomportamiento de la hemoglobina frente a diferentes sustancias como nitrito, monóxido de carbono, etc.
- Observar y analizar el efecto que produce la concentración en una solución sanguínea
- Obtener las absorbancias para las distintas especies de hemoglobina preparadas a partir de oxihemoglobina (desoxihemoglobina, nitrosilhemoglobina, metahemoglobina y oxihemoglobina)
- Someter la muestrapreparada de metahemoglobina a una columna de exclusión
Resultados
1. El test de efecto de la concentración salina se realizó con células lavadas en 9 tubos de ensayos distintos cada uno con las siguientes características:
Tubo 1 2 3 4 5 6 7 8 9
% NaCl 0 0.6 0.8 1.0 2.0 6.0 10 16 20
VNaCl 20% (ml) 0 0.3 0.4 0.5 1.0 3.0 5.0 8.0 10
V Agua (ml) 10 9.7 9.6 9.5 9.0 7.05.0 2.0 0
Gotas de células 2 2 2 2 2 2 2 2 2
Al finalizar el tiempo de espera del test se observó lo siguiente:
El tubo 1: tenía un color rojo-naranjo y no se observó precipitado.
El tubo 2: tenía un color relativamente naranjo y con un poco de precipitado.
El tubo 3: tenía color naranjo muy tenue y con más precipitado que el segundo.
El tubo 4: se notaba más bien incolora y conteníamayor precipitado.
El tubo 5: incoloro y aún más precipitado.
El tubo 6: también se notaba incolora pero con cierto color anaranjado y con menos precipitado (similar al tubo) 4.
El tubo 7: se aprecia un color levemente naranjo y turbio, con precipitado mayor que el tubo 8 y 9.
El tubo 8: el color naranjo se notó más que en el tubo 8 y con menos precipitado, pero mayor que el tubo 9.
El tubo9: se acercaba más al color rojo-naranjo como en el tubo 1 y con muy poco precipitado.
En general los tubos se pueden clasificar en grupos de a 3 debido a que eran bastante similares: 1-2-3 con apariencia de solución hipotónica, 4-5-6 con apariencia isotónica y 7-8-9 con apariencia hipertónica. Se puede decir que entre el tubo 1 y el 9 se observó el cambió de hipotonicidad a hipertonicidad.2. Los espectros de absorción de las diferentes especies de hemoglobina arrojaron los siguientes resultados:
Espectros de
Absorción Absorbancia
Experimental (nm) Absorbancia
Descrita (nm)
Oxihemoglobina 541 - 576 540 - 574
Desoxihemoglobina 554 555
Nitrisilhemoglobina 546 - 573 545 - 565
Metahemoglobina 498 - 633 500 - 630
También existieron principalmente en el...
Leer documento completo
Regístrate para leer el documento completo.