bioquimica
FACULTAD DE CIENCIAS E INGENIERÍAS BIOLÓGICAS Y QUÍMICAS
PROGRAMA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
CURSO:BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
DOCENTE:
ALUMNO:
ANGEL RAUL ZAMATA PALOMINO
AREQUIPA – PERÚ
2013
INTRODUCCION:Los ácidos nucleídos separados en geles de agarosa pueden visualizarsemediante tinción con colorantes fluorescentes, lo cual permite evaluar su integridad y estimar su concentración
mediante un análisis comparativo con patrones de concentración conocida. Los colorantesfluorescentes actúan mediante inserción entre las pares de bases que conforman el ácido
nucleíco. El bromuro de etidio es ampliamente utilizado para la visualización de ADN y ARN. Sin embargo, éstees un reactivo altamente tóxico, con propiedades mutagénicas, por lo que debe ser manejado con extremo cuidado en el laboratorio. En la actualidad existen colorantes fluorescentes
alternativos,como SYBR Safe, SYBR Gold, SYBR Green I, Vistra Green y Syto60.
PROCEDIMIENTO
1. Des pues de agregar isopropanol 500ul centrifugar, luego lavar con etanol al 96% ,centrifugar y agregar bufferTE 50ul
ELECTROFORESIS DEL ADN
20ml ----------- 100
X ------------2%
X = 40X = 0.4gr
100
1. . Pese 0.4 gr. de agarosa. En la micro balanza , medir 20ml de TAE en la probeta
0.4gr AGAROSA 20ml TAE2. Coloque la agarosa dentro de un envase de vidrio que contenga 20 mL de buffer TBE 0,4X y lleve al fuego que caliente hasta su completa disolución. luegoenfriar agitanto
. enfriar agitando
3. Nivelar el stok con el nivel
Nivelarel estaff...
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