bioquimica

Punto Isoeléctrico de Aminoácidos y Proteínas


I Objetivos:


Analizar el comportamiento de las proteínas e aminoácidos durante su punto isoeléctrico.
Determinar experimentalmente el punto isoeléctrico de algunos aminoácidos y proteínas.
Determinar la solubilidad de algunos aminoácidos en diferente disolvente.


II Marco teórico

El punto isoeléctrico es definido como el pH en elcual el número de carga positiva se iguala al número de carga negativas que aportan los grupos ionizables de una molécula.(1) En el punto isoeléctrico la carga neta de la molécula es cero .una característica de las proteínas es que la carga total que adquieren depende del pH del medio en el que se encuentren y de los aminoácidos que la componen así como de las cargas de cualquier ligando que seencuentre unido a la proteína de forma covalente. Debido a la composición de los aminoácidos de la proteína, los radicales libres pueden existir en tres formas dependiendo del pH: catiónicos, neutros y aniónicos. Cualquier proteína tendría una carga neta positiva si se encuentra en un medio lo suficientemente acido debido a que loa grupos COOH de los aminoácidos aspártico y glutámico estarían en suforma neutra pero los grupos aminos de arginina y lisina estarían protonados (-NH3).
De igual forma si la proteína se encuentra en un medio con un pH muy alto estaría cargado negativamente ya que en este caso los grupos carboxilo estarían desprotonados y los grupos aminos magnitud de dicha disociación es igual tanto en el aspecto acido como en el alcalino, se dice que el compuesto se hallaeléctricamente neutro y en su punto isoeléctrico.


El punto isoeléctrico   es el pH al cual la carga neta es cero y no ocurre migración de un campo eléctrico. Para los aminoácidos usualmente se consideran como el punto isoionico donde las cargas positivas y negativas son iguales. En el caso de las proteínas, estos dos puntos no son siempre los mismos, puesto que, a los aminoácidos pueden unírselesiones diferentes al ion hidrogenión (H+).
pK1 es el punto de ionización del grupo carboxilo. Normalmente es un pH bajo.
pK2 es el punto de ionización del grupo amino. Normalmente es un pH alto.
Cuando los aminoácidos presentan mas de un grupo ionizable la formula cambia, como seria en el caso del acido aspártico, que presenta un grupo carboxilo y un grupo amino; siendo más acido el grupocarboxilo unido al grupo alfa, menos acido el grupo carboxilo alejado de este   y básico el grupo amino.

III Materiales:
Buretas, soportes, pinzas de buretas, potenciómetros, solución de ácido glutámico, glicina, hidróxido de sodio, ácido clorhídrico
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Reactivos:

Acido clorhídrico: liquido incoloro, levemente amarillo, densidad 1120kg/m3,masamolar 36.5g/mol, punto de fusión 247 k, punto de ebullición 321k .por ingestión produce gastritis ,irrita piel y ojos.

Hidróxido de sodio: sólido blanco, densidad 2,1g/ cm3, masa molar 39,9 g/mol, punto de fusión 596k, punto de ebullición 16637k.puede causar daños al sistema gastrointestinal, causa quemaduras en los ojos.

Ácido Glutámico: es uno de los 20 aminoácidos que forman parte de lasproteínas. El ácido Glutámico es crítico para la función celular y no es nutriente esencial porque en el hombre puede sintetizarse a partir de otros compuestos. Pertenece al grupo de los llamados aminoácidos ácidos, o con carga negativa a pH fisiológico, debido a que presenta un segundo grupo carboxilo en su cadena secundaria. Sus pK son 1,9; 3,1; 10,5 para sus grupos alfa-carboxilo, delta-carboxiloy alfa-amino.

Glicina: es uno de los aminoácidos que forman las proteínas de los seres vivos. En el código genético está codificada como GGT, GGC, GGA o GGG. Es el aminoácido más pequeño y el único no quiral de los 20 aminoácidos presentes en la célula. Su fórmula química es NH2CH2COOH y su masa es 75,07. La glicina es un aminoácido no esencial. Otro nombre (antiguo) de la glicina es...