BIOQUIMICA

Practica 4
Determinación de proteínas
Las proteínas son macromoléculas orgánicas ampliamente distribuidas en el organismo. Actúan como elementos estructurales y de trasporte y parecen bajo formade enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulación, etc.
En el plasma las proteínas contribuyen a mantener el volumen del fluido circulante transportan sustancias relativamente insolubles yactúan en la inactivación de compuestos tóxicos y en defensa contra agentes invasores.
La determinación de proteínas total es útil para el monitoreo de cambios ocasionados por diversos estados deenfermedad. En condiciones patológicas como perdidas renales, desnutrición, infecciones prolongadas, etc, suelen presentarse hipoproteinemias con desarrollo de edema y ascitis o acumulación de líquidoen la cavidad abdominal, mientras que en otras como mieloma múltiple, endocarditis bacteriana y hemoconcentración de diversos orígenes (ej. Deshidratación) se observan hiperproteinemias.
Objetivo:Determinar la concentración de proteínas total, en una muestra de suero sanguíneo como apoyo al diagnóstico clínico, de acuerdo a los métodos actuales.
Fundamento:
Los enlaces peptídicos de lasproteínas reaccionan con el ion cúprico en medio alcalino, para dar un complejo color violeta con máximo de absorción a 540 nm.
Material:
Espectrofotómetro.
Pipetas automáticas de 10 – 100 ul y de100 a 1000 ul.
Tubos de ensayo y gradilla.
Tubos de espectrofotómetro
Kit de toma de muestra: ligadura, torundas de algodón, alcohol yodado, tubos de tapa morada.
Papel paraflim y papel toallaReactivos: kit de reactivos para determinación de proteínas total.
Muestra biológica: suero sanguíneo.

Procedimiento:
En tres tubos deensayo marcados B (blanco), E(estándar) y D(desconocido), colocar:
B E D
Estándar...