Bioquimica

Poligalacturonasa








1. Explicación del significado del número asignado por la Comisión de Enzimas. (1 pto)
poligalacturonasa es una
EC 3.. Enzima Hidrolasa
EC3.2.-.--
 EC 3.2.1.15


2. Descripción de las características bioquímicas de algún ejemplar de la enzima indicando el organismo del que se obtuvo, tamaño, sustrato(s), parámetroscinéticos (Km, Vmáx) especificando el pH y la temperatura a la que fueron medidos (pueden coincidir con los reportados bajo el enunciado 
4) (6pts)
3. Representar mediante una ecuación lareacción catalizada por la enzima. (3pts)

4. Investigar un procedimiento apropiado para estudiar la actividad enzimática (3 pts)

se midieron valorando la formación de azúcaresreductores mediante el método del ácido 3,5 dinitrosalicílico (DNS) (Miller, 1959). Para la actividad hidrolasa se empleó como sustrato una solución de ácido poligalacturónico (0,5%)preparada en buffer citrato 0,05 M pH 4 y en el caso de la acitividad endoglucanasa el sustrato fue una solución de carboximetilcelulosa al 0,5 % preparada en el mismo buffer. Se leyóabsorbancia a 540 nm.
La cantidad de azúcares reductores liberados por la actividad enzimática se valoró frente a una recta patrón de ácido D-galacturónico (Sigma). La unidad de actividadenzimática se definió como la cantidad de enzima que cataliza la liberación de 1 µmol de azúcar reductor por minuto por mililitro de sobrenadante bajo las condiciones de ensayo utilizadas.La actividad específica fue expresada como unidades de actividad enzimática por DO a 600 nm.

5. Comentar por qué es importante especificar los parámetros del procedimiento en elpunto 5 (5 pts).
6. Definir/explicar la importancia del control de la actividad de esta enzima en un alimento específico 
(o en algún proceso asociado a los alimentos) (5 pts)