bioquimica

BIOQUÍMICA
domingo, 21 de agosto de 2011
PUNTO ISOELECTRICO DE AMINOACIDOS Y PROTEÍNAS
.EXPERIMENTO 2

            PUNTO ISOELECTRICO DE AMINOACIDOS Y PROTEÍNAS 
 Objetivos:


   1.1.  Determinar los pKa de un aminoácido polar con carga y un aminoácido no polar, mediante titulación con álcali.

   1.2.   Estimar el punto isoeléctrico de los aminoácidos polares y no polares delgráfico de pH vs volumen de base.

   1.3.   Determinar el punto isoeléctrico de una proteína mediante  la técnica de precipitación.

2. Introducción:

            El punto isoeléctrico se define comoel pH en el cual el número de cargas positivas se iguala al número de cargas negativas que aportan los grupos ionizables de una molécula. En el punto isoeléctrico la carga neta de la molécula es cero(0). En los aminoáci­dos los grupos ionizables corresponden a grupos carboxilos, amino, fenólicos y tiólicos.

Aminoácido
Abrev
Letra
pKa1
pKa2
pKa3
Glicina
Gly
G
2.35
9.78

Alanita
AlaA
2.35
9.87

Valina
Val
V
2.29
9.74

Leucina
Leu
L
2.33
9.74

Isoleucina
Ile
I
2.32
9.76

Metionina
Met
M
2.13
9.28

Prolina
Pro
P
1.95
10.64

Fenilalanina
Phe
F2.20
9.31

Triptofano
Trp
W
2.46
9.41

Serina
Ser
S
2.19
9.21

Treonina
Thr
T
2.09
9.1

Asparragina
Asn
N
2.14
8.75

Glutamina
Gln
Q
2.17
9.13

Tirosina
Tyr
Y
2.209.21
10.46 Fenol
Cisterna
Cys
C
1.92
10.7
8.37 Sulfhidrilo
Lisina
Lys
K
2.16
9.06
10.54 ε-Amino
Arginina
Arg
R
1.82
8.99
12.48 Guanidinio
Histidina
His
H
1.80
9.33
6.04Imidazol
Acido aspáratico
Asp
D
1.99
9.90
3.90  β-COOH
Acido glutámico
Glu
E
2.10
9.47
4.07  γ-COOH
               
TABLA 1: Valores de pKa de los grupos ionizables de los á-aminoácidos.                 Fuente: http://www.qb.fcen.uba.ar/quimicabiologica/Tabla%20pKa.html

            El pI de los -aminoácidos monoamino-monocarboxílicos, siempre está cercano a pH = 6. Este valor...