Bioquimica

Páginas: 2 (322 palabras) Publicado: 2 de octubre de 2012
La enzima succinato deshidrogenasa o deshidrogenasa del ácido succínico es una
Oxidorreductasa que cataliza la oxidación del succinato para formar fumarato siendo la coenzima
el FAD. Estaenzima se localiza en eucariotes en la membrana mitocondrial interna.
El H2 cedido por el succinato puede ser transferido del FADH2 a un colorante susceptible
como el azul de metileno que alcambiar su estado redox pasa de coloreado a incoloro o
viceversa.
COOH COOH
CH2 CH
Succinato deshidrogenasa
II
CH2 HC
COOH COOH
FAD
FADH2
I
I
I
I
I
Succinato deshidrogenasa
FADH2FAD
Azul de
metileno
oxidado
Azul de
metileno
reducido
OBJETIVO:
Que el alumno aprecie la actividad de le enzima Succinato Deshidrogenasa
mediante una reacción colorimétrica.
Que elalumno relacione la presencia de esta enzima con el Ciclo de Krebs y el
transporte de electrones
MATERIAL:
• 2 tubos de ensaye
• 2 pipetas de 5ml
• Baño María a 50ºC
• Pinzas para tubode ensaye
REACTIVOS:
• NaOH al 10%
• Ácido succínico al 3%
neutralizado con NaOH al 10%
hasta pH=7.4
• Fenol al 90%
• Azul de metileno al 0.1%
• Aceite mineral
• Hígado de rata
Fac.Cs. Qs. Dpto. De BIOQUÍMICA - ALIMENTOS
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA I
Q.F.B
7
DESARROLLO:
1. Pesar 1gr. de hígado de rata recientemente sacrificada.
2. En el mortero molerlo con 3 ó 4ml deácido succínico hasta obtener una masa.
3. Transferir en partes iguales a 2 tubos y proseguir según la siguiente tabla.
Número de tubo
Reactivo 1 2
Fenol al 90% 1.0ml ---
Azul de metileno 2.0gotas 2.0 gotas
MEZCLAR CADA TUBO
Aceite mineral 0.5ml 0.5ml
4. Incube ambos tubos 10 minutos en el baño María a 50ºC
5. Observe los cambios
CUESTIONARIO:
1. ¿Cuáles son los colores delazul de metileno en sus estados oxidado y reducido?
2. ¿Cuál es la función del fenol en la reacción?
3. ¿En qué vías metabólicas está involucrada la enzima succinato deshidrogenasa?.
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