bioquimica
PROBLEMAS DE CINETICA ENZIMATICA.
1. Una enzima cataliza una reacción con una velocidad máxima de 5 μmoles por
minuto, siendo su Km para el sustrato de 0,5 mM. Si la ponemos en presencia de una
concentración 500 mM de sustrato, ¿Qué cantidad de sustrato se logrará transformar en
10 min?
2. La Km de una hexoquinasa para la glucosa es 10-4 M. Si la concentraciónde glucosa
en el medio de reacción es 1,8 μg/ml, ¿cuál será la relación [E]/[ES]? (Pm glucosa=
180).
3. La Km para el etanol de la alcohol deshidrogenasa de levadura es de 1,3 x 10-2 M. Si
la concentración de alcohol en el medio de reacción es de 59,8 μg/ml, ¿qué proporción
de enzima estará libre y qué proporción estará combinada con el sustrato? (Pm etanol=
46).
4. Calcular quévelocidad se obtendrá en una reacción enzimática si la velocidad
máxima es igual a 100 y la concentración de sustrato es igual: a) 10 Km y b) Km/3.
5. Calcular qué concentración de sustrato, expresada en función de la Km, nos dará una
velocidad de reacción enzimática igual al 60% de la velocidad máxima.
6. Calcular la relación entre la concentración de sustrato necesaria para una velocidad
90% dela velocidad máxima y la requerida para una velocidad 10% de la velocidad
máxima, es decir [S]90/[S]10, para una enzima cuya cinética de saturación sigue una
hipérbola.
7. Una enzima cuya Km= 2,4 x 10-4 M se ensaya con las siguientes concentraciones de
sustrato: a) 2 x 10-7 M; b) 6,3 x 10-5 M; c) 10-4 M. La velocidad medida en la reacción
con 5 x 10-2 M de sustrato fue de 0,128 μmoles/min.Calcular las velocidades iniciales
en los otros casos.
8. Una enzima cataliza una reacción a una velocidad de 35 μmoles/min cuando la
concentración de sustrato es 0,01 M. La Km para el sustrato es 2 x 10-5 M. ¿Cuál será
la velocidad inicial a las concentraciones de sustrato: a) 3,5 x 10-3 M; b) 4 x 10-4 M; c)
2 x 10-4 M; d) 2 x 10-6 M y e) 1,2 x 10-6 M?.
9. A partir de los siguientesdatos obtenidos para una reacción catalizada
enzimáticamente, calcular gráficamente la Km y la Vmax de dicha enzima
Sustrato (mM) Velocidad (μmoles/min)
0,5 1,00
1,0 1,67
1,5 2,40
2,0 2,50
2,5 2,78
3,0 3,00
10. 25 μl de una preparación enzimática se llevan a ensayo a un volumen de reacción
estándar de 1 ml y a temperatura y pH óptimos, pero con distintas concentraciones
iniciales desustrato, obteniéndose las velocidades iniciales que se indican:
Sustrato (mM) Velocidad (nmol/min)
303 x10-3 120,0
149 x10-3 98,0
128 x 10-3 92,6
100 x10-3 83,3
80 x 10-3 74,6
a) Determínese la Km de la enzima y la velocidad máxima que se puede conseguir con
la concentración de enzima utilizada.
b) ¿Qué cantidad de enzima, expresada como U/ml, contiene nuestra preparación
enzimática?.
11.La descarboxilación enzimática de un ß-cetoácido procede con las velocidades
iniciales para las concentraciones que se citan:
[cetoácido] (mM) Velocidad (μmoles CO2/2 min)
2,500 0,588
1,000 0,500
0,714 0,417
0,526 0,370
0,250 0,252
A partir de estos datos calcular Vmáx y Km de esta reacción enzimática.
12. Un sustrato fue hidrolizado por una enzima y la velocidad inicial dedesaparición
fue medida para distintas concentraciones del mismo. Calcular la Km y la Vmáx a partir
de los datos que se resumen a continuación:
Sustrato (mM) Velocidad (μmoles/min)
2,3 0,95
3,0 1,13
4,5 1,42
12,0 2,14
38,0 2,64
13. A partir de los siguientes valores determinar gráficamente Km y Vmáx para una
reacción enzimática:
Sustrato (mM) Velocidad (μmoles P/2 min)
5,000 0,392
2,000 0,3301,420 0,278
1,052 0,246
0,500 0,170
14. ¿Qué información puede obtenerse a partir de una representación de Lineweaver-
Burk cuando la recta obtenida, convenientemente extrapolada, corta al eje de abscisas
en -40 litros/mol?
15. ¿Qué información puede obtenerse de una representación de Lineweaver-Burk
sabiendo que cuando (1/[S]) x 10-2= 2,5 M-1, 1/v=0.
16- Al representar por el...
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