bioquimica
SUSTITUCIÓN DE AMINOACIDOS: Blosum 62 - Blocks of amino acid su […]
Lisina por arginina (conservativa)
Lisina por triptófano ( no conservativa) dif. de carga, por loque la semejanza es negativa.
Purificación (caracts basicas que nos permitiran separarlas):
Ensayos (pruebas) de actividad o presencia: puedes saber la capacidad enzimatica por lavariacion de absorbancia.
Concentracion de proteina: Tinción (carga, basicidad, cadenas hidrofob…)
Extraccion de la celula: Preparacion del homogenado (liberacion del contenido de las celulas porcentrifugacion)
Separaciones basadas en solubilidad, grandaria, carga neta e interaccion con ligandosPrecipitacion por sal: Sulfato de aminio,
altera la hidrofobicidad del agua haciendo que precipiten.
Dialisis
ESTRUCTURA DE UN ANTICUERPO:
Parte fija
Parte variable: que reconoce específicamente a los antigenos, uniendose y haciendolo precipitar (anticuerpos policlonales)
Indirect ELISA"Western" BlotA partir de diapositiva (estrategias de purificacion de proteinas con cromatografia en rojo)
martes, 7 de octubre de 2014
16:59
Cromatografia: exclusion molecular, intercambioionico, de afinidad…
Principio basico de la separacion por cromatografia o electroforesis. Fase mobil y fase estatica (las moleculas tienen afinidad diferente por esta fase, quedando unas enganchadas yotras no)
Exclusion molecular: fase estatica en una columna (gravedad), algunas se enredan otras no.
Intercambio ionico: carga negativa, los de carga + se enganchan los que no no.
Cualquier variacionde las propiedades (*)
Por la afinidad con la glucosa.
Aumentar la presion y hacer pasar mas rapidamente la muestra
Electroforesis: SDS agente desnaturalizante (les da carga negativa y lasdesnaturaliza) mas masa de proteinas mas carga negativa. SDS da informacion adicional del peso molecular.
Isoelectroenfocament: ¿poliamfolits? (+/- son los polianfolitos que hacen que los que se mueven +...
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