bioquimica

Introducción
El punto isoeléctrico de un aminoácido es el pH al cual no tiene carga neta. El punto isoeléctrico (pI) de un aminoácido que no tiene una cadena lateral ionizable es un término medioentre sus dos valores de pKa, tal es el caso de la alanina; mientras que el pI de la mayor parte de los aminoácidos que sí tienen cadena lateral ionizable es el promedio de los valores de pKa de losgrupos que se ionizan en forma similar.
Para separar una mezcla de aminoácidos existen varias técnicas, tales como electroforesis, cromatografía y cromatografía de intercambio iónico.
Ladesnaturalización o precipitación de proteínas se refiere a cuando las proteínas pierden las estructuras de orden superior, quedando la cadena polipeptídica reducida a un polímero sin ninguna estructuradimensional fija. Cualquier factor que modifique la interacción de la proteína con el disolvente disminuirá su estabilidad en disolución y provocará la precipitación.

Objetivos
- Analizar el efecto queproduce la modificación de factores fisicoquímicos sobre la solubilidad de las proteínas.
- Determinar el punto isoeléctrico de la insulina, basándose en sus propiedades de solubilidad a diferentesvalores de pH.

Resultados
I. Separación de proteínas por precipitación con sales (salting out).

Biuret
Interpretación
Sobrenadante
( + )
color violeta
presencia de proteínas
Precipitado 1
(+ )
color violeta
presencia de proteínas
Filtrado
(–)
sin proteínas
Precipitado 2
( + )
color violeta
presencia de proteínas



II. Precipitación por efecto del pH.
Tubo No.
1
2
34
Clara de huevo filtrada 1:3 (ml)
3.0
3.0
3.0
3.0
HCl 0.1N (ml)
1.0
-
-
-
NaOH 0.1N (ml)
-
1.0
-
-
Regulador de acetatos 0.1M pH 4.7 (ml)
-
-
1.0
-
Agua
-
-
-
1.0Observaciones
Mucho precipitado
Quedó suspendido
Precipita
No precipita
Interpretación de resultados: Después de la adición de HCl, NaOH, regulador de acetatos y agua a distintos tubos con clara de huevo...