Bioquimicas

Lisina Hierro Agar. Medio de cultivo utilizado para diferenciar microorganismos, especialmente Salmonella spp., basado en la decarboxilación / desaminación de la lisina y en la producción de ácido sulfhídrico.FundamentoEn el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes para el desarrollo bacteriano. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable, y la lisina esel sustrato utilizado para detectar la presencia de las enzimas decarboxilasa y deaminasa. El citrato de hierro y amonio, y el tiosulfato de sodio, son los indicadores de la producción de ácido sulfhídrico. El purpura de bromocresol, es el indicador de pH, el cual es de color amarillo a pH igual o menor a 5.2, y de color violeta a pH igual o mayor a 6.8.Por decarboxilación de la lisina, seproduce la amina cadaverina, que alcaliniza el medio y esto produce el viraje del indicador al color violeta. La decarboxilación de la lisina, tiene lugar en medio ácido, por lo que es necesario que la glucosa sea previamente fermentada.Los microorganismos que no producen lisina decarboxilasa, pero que son fermentadores de la glucosa, producen un viraje de la totalidad del medio de cultivo al amarillo,pero a las 24 hs de incubación se observa el pico de color violeta debido al consumo de las peptonas, y el fondo amarillo.La producción de sulfuro de hidrógeno, se visualiza por el ennegrecimiento del medio debido a la formación de sulfuro de hierro.Las cepas de los géneros Proteus, Providencia y algunas cepas de Morganella, desaminan la lisina, esto produce un ácido alfa-ceto-carbónico, el cual,con la sal de hierro y bajo la influencia del oxígeno forma un color rojizo en la superficie del medio.
Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones
  Peptona de gelatina 5.0 Suspender 35 g del medio deshidratado en un litro de agua destilada. Dejar embeber unos 15 minutos. Calentar cuidadosamente, agitando con frecuencia y hervir durante un minuto hasta la disolución completa. Distribuir yesterilizar a 121°C durante 15 minutos. Enfriar en pico de flauta dejando un fondo vertical apto para la punción.
  Extracto de levadura 3.0   Glucosa 1.0   Lisina 10.0   Citrato de hierro y amonio 0.5   Tiosulfato de sodio 0.04   Púrpura de bromocresol0.02   Agar 15.0 pH final: 6.7 ± 0.2
SiembraPor punción profunda con aguja de inoculación.
IncubaciónEn aerobiosis, durante 24 horas a 35-37 °C.Resultados 1- Decarboxilación de la lisina:-Prueba Positiva: Pico violeta/fondo violeta.-Prueba Negativa: Pico violeta/fondo amarillo.2-Desaminación de la lisina:Pico rojizo/fondo amarillo. Esto sucede con cepas del género Proteus, Providencia y alguna cepas de Morganella spp.3-Producción de ácido sulfhídrico:-Prueba positiva: Ennegrecimiento del medio (especialmente en el límite del pico y fondo)Microorganismos Color en el pico de flauta Color en la base del tubo Ennegrecimiento del medio
Proteus mirabilis ATCC 43071 Rojo Amarillo Negativo
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Púrpura Púrpura Positivo
Salmonella enteritidis ATCC 13076 Púrpura Púrpura Positivo
Providencia spp. Rojo Amarillo Negativo
Citrobacter freundiiPúrpura Amarillo Positivo
Morganella spp.* Rojo Amarillo NegativoEdwarsiella spp. Púrpura Púrpura Positivo
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Púrpura Púrpura Negativo
Escherichia coli ATCC 25922 Púrpura Púrpura Negativo
*Algunas especies de Morganella spp., pueden desaminar la lisina.
Características del medioMedio preparado: color violeta.AlmacenamientoMedio deshidratado: a 10-35 ºC.Medio preparado: a 2-8 ºC.
Presentación 
x 100g :Código:  B02-106-05 x 500g:Código:  B02-106-06
MIO Medio. Medio usado para la identificación de Enterobacteriaceae en base a su movilidad, actividad de ornitina decarboxilasa y producción de indol. FundamentoMedio de cultivo semisólido, altamente nutritivo debido a la presencia de extracto de levadura, peptona y tripteína. Además, la tripteína aporta grandes cantidades de triptofano, sustrato de la enzima triptofanasa,...