Bioquímica
1. Identificación de aminoácidos con Ninhidrina y su diferenciación con proteínas.
Tubo | Solución 1 | Solución 2 | Coloración Final |
1 | aa. glicina 5 mL | Ninhidrinaen alcohol 0,5 mL | Azul rey fuerte |
2 | aa. prolina 5 mL | Ninhidrina en alcohol 0,5 mL | Amarillo |
3 | Proteína albúmina 5 mL | Ninhidrina en alcohol 0,5 mL | Celeste |
4 | Agua destilada 5mL | Ninhidrina en alcohol 0,5 mL | Incolora |
Se sometieron los tubos a baño María, dejándolos hervir por 2 minutos y se dejaron enfriar.
* Reacción de la Ninhidrina: sirve para conocer yvalorar cuantitativamente a los aminoácidos. La Ninhidrina en presencia de aminoácidos alfa se torna en color azul a azul violeta, en este caso la solución Ninhidrina más aminoácido glicina, luego desometerla a calor, tornó a color azul. Los aminoácidos son descarboxilados por oxidación, formando amoniaco más CO2 y un aldehído. A esta reacción existe una excepción con los aminoácidos prolina ehidroxiprolina, que dan coloración amarilla.
La solución Ninhidrina mas solución proteína albumina dio coloración celeste, esto se debe a la escasa presencia de NH2 libres en la proteína, por lo cual sele considera negativa.
2. Reacción Xantoproteica.
Tubo | Solución 1 | Solución 2 | Coloración final |
1 | Proteína albúmina 2 mL | Ácido nítrico concentrado 1 mL | Amarillo opaco |
2 |aa. tirosina 2 mL | Ácido nítrico concentrado 1 mL | Amarillo verdoso |
3 | aa. glicina 2 mL | Ácido nítrico concentrado 1 mL | Incoloro |
4 | Agua destilada 2 mL | Ácido nítrico concentrado 1 mL |Incoloro |
Se calentaron los tubos en baño María suavemente hasta ebullición.
* Reacción Xantoproteica o reacción del ácido nítrico: la solución proteica albumina y aminoácido tirosina tomanun color amarillo, esto se debe a la formación de un compuesto aromático nitrado, además demuestra que es una proteína con aminoácidos que lleva el anillo bencénico (aromático)
3. Reacción de...
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