Bioseparaciones

RUPTURA CELULAR



División de Ingeniería Química y Bioquímica-Ingeniería en Bioseparaciones

Tecnológico de Estudios Superiores de Ecatepec, Jalisco 44430, México

RESUMEN

En este documento se habla sobre la obtención de glucógeno a partir de hígado de res se hablara también sobre lo que es el glucógeno y sobre la ruptura celular que obtendremos de igual manera del hígado y seutilizara el método de titulación para los azucares reductores.

Palabras clave: glucógeno, titulación,



INTODUCCION.

Los seres vivos almacenan glúcidos en forma de polisacáridos, que sirven como materiales de reserva. El almidón, la inulina en los vegetales superiores y el glucógeno en los animales.
El glucógeno consta de cadena de glucosa unidas por enlaces glicosídicos a(1-4) yramificaciones, cada 8 ó 10 unidades, de glucosa mediante enlace glicosídico a (1-6).
El glucógeno es especialmente abundante en el hígado en donde puede ocupar hasta un 10% de su peso y en músculo, un 1%. En situación de ayuno, el glucógeno es la primera reserva que se moviliza para mantener la glucemia, al menos durante dos horas.
La extracción del glucógeno del hígado de esta práctica implica un procesode homogenización del tejido y ruptura celular, así como la extracción y la eliminación de las proteínas (desproteinizar) para evitar interferencias en los análisis posteriores. Para la valoración posterior de la glucosa (que en esta práctica solo se realizará de forma cualitativa) hay que someter al precipitado de glucógeno a una hidrólisis ácida, de esta forma se rompen los enlaces glicosídicosy se libera glucosa.
FUNDAMENTO TEORICO.

1. RUPTURA CELULAR.

La lisis celular es la rotura de la membrana celular. Todas las células tienen una membrana hecha de fosfolípidos que separan el contenido celular del ambiente extracelular. Los fosfolípidos son anfipáticos y tienen embebidas las proteínas de membrana. La naturaleza de los lípidos y las proteínas varía dependiendo del tipo decélula.
1.1 TIPOS DE LISIS
Existen dos tipos de lisis: la lisis tradicional y la lisis por medio de detergentes.
1.1.1 LISIS TRADICIONAL
• Homogeneización líquida. Las células se rompen al ser forzadas a pasar por espacios muy pequeños.
• Sonificación. Ondas de alta frecuencia rompen las células.
• Congelamiento. Ciclos de congelación continuos rompen la célula induciendo laformación de cristales.
1.1.2 LISIS POR MEDIO DE DETERGENTES
Lisis celular por medio de detergentes es una manera más suave de romper la membrana celular. (Alberts Bruce, Bray Dennis.2006)
2. GLUCOGENO
Es un polímero de residuos de glucosa muy grande y ramificada. La mayoría de las glucosas del glucógeno están unidas por enlaces [pic] -1,4 glicosídicos. Las ramas se forman por enlaces[pic]-1,6-glicosidicos.
El glucógeno es una importante reserva de combustible, también sirve como amortiguador para mantener los niveles de glucosa en sangre
2.1AISLAMIENTO DE GLUCOGENO
El hígado es un importante sitio de almacenamiento de glucógeno (Mark Berg Jeremy, Stryer Lubert, et al.2008).
2.1.2 EXTRACCION DEL GLUCÓGENO EN EL HÍGADO.
El glucógeno se libera de los tejidos que lo contienen porcalentamiento con una base fuerte (KOH) hasta la destrucción total del tejido. La separación del glucógeno del tejido se consigue mediante la adición de etanol (precipita polisacáridos y elimina los monosacáridos solubles) y sulfato de sodio (precipitante). Así, se produce un precipitado que contiene una mezcla de glucógeno, proteínas y ácidos nucleicos, que han resistido el calentamiento anterior.

Eltratamiento posterior con ácido tricloroacético (TCA) hace que precipiten las proteínas y ácidos nucleicos de la mezcla. El glucógeno aislado se vuelve a precipitar con etanol, obteniéndose una preparación con un alto grado de pureza. (1)




3. AZUCARES REDUCTORES


Carbohidratos que tienen uno o más carbonos anomericos disponibles para oxidación con un agente oxidante suave, es...