Biotec Animal 6

¿Cual es el objetivo de realizar Biotecnología animal?
A.

Biotecnologí
Biotecnología animal

B.
C.
D.

Se pueden generar animales modificados (“animales
transgénicos”) para muchos propósitos, que sirvan de
modelos a enfermedades humanas o introducir nuevos
caracteres a animales importantes en producción como vacas
o peces
Métodos genéticos como selección asistida por marcadores
(MAS) ayuda aidentificar zonas en el cromosoma con
caracteres importantes como crecimiento
Los genes se pueden transferir a través de especies, familias
e incluso reinos como resultado de tecnología del DNA
recombinante
Los principales objetivos de la biotecnología animal son razas
que sean más nutritivas y animales económicamente más
productivos, incrementen el crecimiento y desarrollo, así como
anticuerpos yproducción de vacunas

Métodos de transferencia de genes
en animales

Métodos de transferencia de genes
en animales

Para insertar un gen correctamente en un animal, el
gen (denominado el transgen) necesita
expresarse en el momento adecuado y la
cantidad y lugar adecuado del animal
Promoters y secuencias reguladoras son esenciales
El gen se debe incorporar al cromosoma para una
expresiónadecuada

Microinyección
1. La inyección del gen de interés en un huevo
fertilizado de un animal donador
2. El gen debe ser insertado antes que la primera
división celular de tal modo que todas las
células del animal contienen el gen

3.

Los pasos en el proceso son:
a. Identificació
Identificación (y a veces modificació
modificación por mutació
mutación) de
un gen de interé
interés
b. Inserció
Insercióndel gen de interé
interés en el vector apropiado
c. Microinyecció
Microinyección del DNA dentro del pronucleo de un
huevo fertilizado
d. Implantació
Implantación del huevo microinyectado en una madre de
alquiler
e. Permitir el desarrollo del embrió
embrión hasta su nacimiento
f. Demostració
Demostración que el gen ha sido incorporado de manera
estable en el genoma huesped y es heredado en ladescendencia
g. Demostrar que el gen se expresa y es correctamente
regulado en el organismo del huesped

1

Transferencia génica de célula madre embrionaria

4. Animales fundadores,
fundadores, que son los animales que tienen
el nuevo gen en las cé
células germinales (reproductivas
(reproductivas))
se cruzan para establecer nuevas lí
líneas gené
genéticas con
las caracterí
características deinteré
interés
5. Se ha desarrollado la Microscopí
Microscopía diferencial de
interferencia de manera que el el nú
nú cleo de los huevos
son visibles para insertar en las madres lo antes posible
6. Problemas potenciales:
potenciales:
a. Sobreviven pocos huevos inyectados
b. El gen se inserta al azar en los cromosomas
c. No todas las cé
células del animal reciben el gen
d. El gen no se expresa losuficiente

1.

(ES) Células indiferenciadas que se dividen para producir células
diferenciadas mientras mantienen sus características de
indiferenciadas (llamadas células pluripotentes)
2. Células madre embrionarias “Embryonic stem (ES) cells” se usan
para promover reemplazamiento génico dirigido (recombinación
homóloga) de manera que el gen se inserta en el cromosoma
adecuado
3. Los pasos son lossiguientes:
a. Células ES se extraen del embrión
b. El gen de interés se inserta en las células (llamado
“transfección”)
c. El gen es dirigido por recombinación homóloga y marcadores de
selección
d. Las células ES con el gen adecuado se inyectan en embriones
parcialmente desarrollados denominados “blastocitos”, que se
implanta en una madre
e. La descendencia es cribada por el caracter de interés
4.Se puede usar para modelos de enfermedades humanas como la
enfermedad de Gehrig, cancer, Alzheimer, fibrosis cistica

Problemas con recombinación
homóloga
Recombinación no-homóloga frecuente

Solución: vectores de reemplazo
La construcción KO contiene 1) Gen neoR
Flanqueado por 2) 2 segmentos de gen objetivo
y 3) El gen HSVtk

Parte del gen se reemplaza con neoR
Células ES se seleccionan por la...