biotecnologia microbiana


Universidad autónoma de Aguascalientes
Centro de ciencias básicas
Departamento de Microbiología
Biotecnología
Biotecnología microbiana
Quinto semestre


“Desarrollo y preservación de inóculos”







Aguascalientes, Ags a 02 de septiembre de 2014
Desarrollo de inóculos
Un inoculo microbiano es una preparación solida o líquida la cual contiene una gran cantidad demicroorganismos, como bacterias y hongos. Estos microorganismos se encuentran activados, es decir son viables y están listos para ser, como su nombre lo dice, inoculados en un medio de cultivo o en un biorreactor. Los inóculos pueden ser de un solo microorganismo específico para un tipo de sustrato o ambiente, o puede ser una mezcla de microorganismos que trabajan en conjunto en aguas residuales o enlodos. (Hernández, 2003)
Su modo de preparación requiere de tres pasos esenciales:
1. El primer paso es la recuperación de la cepa microbiana o el aislamiento de la misma si es que se encuentra en un ambiente donde existan otros microorganismos.
2. El segundo paso consiste en cultivar el microorganismo en un medio sólido como método de pre-cultivo, esto con el fin de que el microorganismo seadapte a este tipo de crecimiento.
3. El tercer paso es el crecimiento en un medio de cultivo líquido para preparar al inoculo para poder pasarlo a un biorreactor.
Se deben de tomar en cuenta diferentes aspectos como la cantidad de inoculo y la concentración del microorganismo en el inoculo, esto con el fin de que el medio y los requerimientos que el microorganismo necesite sean los necesarios y nole haga falta nada para su correcto crecimiento. (Hernández, 2003)
Un biorreactor es un recipiente, en muchos casos de forma cilíndrica y de acero inoxidable, que está diseñado para mantener un ambiente biológicamente activo. En muchas ocasiones es utilizado para llevar a cabo reacciones químicas que involucran microorganismos, organismos o sustancias bioquímicamente activas que son capaces dellevar a cabo dichas reacciones. Los biorreactores tienen como objetivo generar una gran cantidad del producto deseado reduciendo los costos y los tiempos, así como utilizando lo menos recursos posibles. (Moreno, S. 1996)

Preservación del inóculo
Métodos de elección o de conservación a largo plazo.
Conservación por congelación.
Se congelan las células en suspensión en un líquido con unagente crioprotector y se guardan a temperaturas inferiores a cero grados centígrados, con lo que el agua se congela. De esta forma, al no disponer las células de agua en forma líquida, no hay crecimiento. Cuando se quiere trabajar con las células así conservadas, se recuperan subiendo la temperatura. Este es el mejor método de conservación desde todos los puntos de vista, pero tiene el inconvenientede requerir aparatos especiales, y además existe el peligro de que algún fallo del sistema produzca una subida no deseada de la temperatura durante el almacenamiento. También resulta ser el método más molesto para realizar el envío de las cepas. Los cuatro factores que influyen en la viabilidad y estabilidad de las células conservadas por este método son los siguientes:
Conservación porliofilización.
Tampoco se da crecimiento en las células conservadas por este método, puesto que se les ha quitado el agua mediante la liofilización, que es un proceso suave. Con ello la estabilidad genética es alta, pero a veces no tanto como en la congelación, porque la liofilización se consigue por sublimación del hielo de las células. Por lo tanto, primero tenemos que congelar el agua libre de lascélulas y después eliminarla mediante el vacío, sin que haya necesidad de subir la temperatura, lo que acabaría afectando a la viabilidad del microorganismo. Para este proceso se emplean los aparatos denominados liofilizadores, de los que hay muchos modelos en el mercado. Las células microbianas así conservadas se someten a un tratamiento más complejo que en el caso de la congelación, pues la...