Biotecnologia - Utn San Frnacisco

2010

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BIOTECNOLOGÍA]

Resumen Paco!!!

BIOTECNOLOGÍA

2010

UNIDAD N°1: ENZIMOLOGÍA
Los organismos vivos tienen la capacidad de llevar a cabo numerosas reacciones químicas a T ambiente. Estas reacciones se producen entre moléculas muy estables que, a pesar de eso, son capaces de reaccionar en presencia de células que las activan y que reciben el nombre de enzimas. Éstas sonCATALIZADORES ORGÁNICOS producidos por las células vivas, pero pueden actuar separadas de estas. Por su naturaleza proteica, las enzimas perderán sus propiedades catalíticas por acción del calor, ácidos y bases fuertes, disolventes orgánicos o cualquier agente capaz de desnaturalizar las proteínas. Especificidad: Actúan solo sobre determinados sustratos (esp. estricta o absoluta), o grupos de sustratos(esp. de grupo). Desde el punto de vista biológico, es importante la estereoespecificidad o especificidad geométrica que se refiere a la capacidad de la enzima para activar la reacción en que interviene uno de varios isómeros geométricos. Existen enzimas que actúan tanto sobre la forma cis como la trans y se llaman estereoisomerasas o racemasas. Obtención: la enzima pueden ser exocelulares oendocelulares. Las 1° ejercen su actividad fuera de las células, las 2° en el interior de la misma y son responsables del metabolismo celular. • Las endocelulares tienen una localización más o menos definida dentro de la célula; mientras algunas están ligadas a ciertas estructuras, otras existen en el citoplasma amorfo y se llaman enzimas solubles. Se pueden extraer de las células y aislarlas sin quepierdan su actividad utilizando procedimientos que no provoquen la desnaturalización. En proceso de extracción, se produce primero la desintegración del tejido y la rotura de las paredes celulares (se suelen utilizar métodos mecánicos, o por altas presiones, ultrasonido, o congelaciones y descongelaciones sucesivas). Luego se utiliza agua destilada o mezcla de sales para suspender las células yextraer la enzima. Un método para producir la rotura celular es tratando la célula con acetona, la cual ataca las membranas celulares. A la vez, es un agente deshidratante, por lo que pueden obtenerse polvos secos que se pueden conservar con facilidad, de los cuales luego se les puede extraer las enzimas con agua o mezclas salinas. • En las exoenzimas, será suficiente separar las células del mediolíquido en donde se encuentran y efectuar en este último las operaciones de concentración y purificación. Para extraer una enzima y para la purificación, se debe trabajar a baja T y con la mayor velocidad posible para evitar la inactivación o pérdida de la enzima. Una vez obtenido el extracto que contiene a la enzima, se procede al aislamiento y purificación de la misma. Para fraccionar una mezclade enzimas, se utiliza precipitación fraccionada por sales. Se emplea casi siempre sulfato de amonio ya que es soluble en agua y en frío. A cierta concentración precipitan determinadas enzimas. A veces se procede de manera inversa, se precipitan casi todas las enzimas y luego se va agregando agua poco a poco para ir disolviendo. Isoenzimas: Igual función catalítica, pero distinta estructura.Cofactores: Grupo no proteico. Enzima = apoenzima (parte proteica) + cofactor • Cuando el cofactor puede separarse fácilmente de la apoenzima (por diálisis), se llama COENZIMA. La apoenzima separada de su coenzima no tiene actividad, pero reuniendo las dos sustancias, reaparece la acción catalítica. • Cuando el cofactor no es separable de la apoenzima, se lo llama grupo prostético (si se separa, sedestruye la enzima). COFACTORES QUE TRANSPORTAN HIDRÓGENO Un nucleótido es un compuesto formado por 3 sustancias simples: ácido fosfórico, ribosa y una base nitrogenada. Las últimas son derivados de la purina y pirimidina. 1. Nucleótidos piridínicos. Son coenzimas de las DEHIDROGRENASAS. Se conocen 2 coenzimas: i) NAD: Nicotinamida adenina dinucleótido. ii) NADP: Nicotinamida adenina dinucleótido...