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Resumen:
Se evaluó la actividad enzimática amilolitica por Bacillus licheniformis, mediante una técnica cuantitativa DNS, donde estimulamos la producción de estas enzimas sembrando el microorganismo en caldo almidón al 1 % (p/v). Se realizó una fermentación discontinua para la inoculación de Bacillus licheniformis en solución salina al 0.85 % (p/v) correspondiente al 10% del volumen efectivode trabajo y se completó con medio estéril caldo almidón al 1 % (p/v), hasta alcanzar el volumen necesario para la fermentación. La muestra correspondiente al tiempo cero dividiéndola en dos tubos 13x100 mm tapa rosca estériles, y llevar uno de ellos a centrifugar a 10.000 r.p.m. por 15 minutos para obtener el extracto crudo. Realizando este procedimiento para todas las 12 horas. Se realizarondiluciones seriadas 10-1 a 10-14 partir del tubo sin centrifugar, posteriormente realizamos las siembras de las ultimas diluciones y se realizó la determinación de biomasa para cada una de ellas. Se controló el tiempo tomando las siguientes muestras (horas) 0, ½, 1, 1½, 2, 4, 6, 8, 10 y 12 horas de fermentación. Realizar el mismo procedimiento que llevó a cabo con el tiempo cero para cada una deestas horas. En la obtención de resultados no se pudo evaluar la actividad amilolitica ya que no se aislaron las colonias y no se diferenciaban los halos de hidrolisis pertenecientes a una colonia, de los de otra cercana.
Palabras clave: Fermentación discontinua, DNS, Bacillus licheniformis, amilasas
Introducción
En los últimos años la biotecnología ha experimentado grandes avances en laobtención de productos químicos enfocados hacia las aplicaciones industriales, donde podemos incluir la industria alimenticia y farmacéutica. los procesos que son catalizados por enzimas cada día son más numerosos ya que presentan una serie de ventajas como la catalizacion a temperatura ambiente, la actividad catalítica y una gran especificidad por el sustrato, frente a los catalizadores convencionales nobiológicos. A pesar de estas ventajas el empleo de enzimas no se ha generalizado en la industria debido a que estas no son estables en las condiciones de trabajo. Por otra parte al ser solubles en agua, su separación de los sustratos y del producto es difícil, por tanto no son reutilizables (Arroyo 1998)
Las enzimas son altamente específicas en la catalizacion de un sustrato según lo demuestraCastro y Cantera (1996) tomando como ejemplo la industria láctea donde se producen lacto sueros, subproductos en la producción de queso y obtención de caseína. Estos sueros son ricos en proteínas de alto valor nutricional: a-lactalbumina (a-La) y beta-lactoglobulina (beta-Lg), pero son en general subaprovechados. Las enzimas proteolíticas son catalizadores biológicos que hidrolizan los enlacespeptídicos. "Su utilización en la industria es muy amplia, y su obtención industrial es en general a partir de microorganismos procarioticos. Entre estos Bacillus subtilis es una importante fuente de enzimas proteolíticas, pero además produce enzimas amiloliticas que impurifican los preparados proteolíticos" (Castro y Cantera 1996).
Estudios como el realizado por Rubio et al (2001) sobre ladigestión ruminal del almidón es uno de los factores más importantes que determinan el comportamiento productivo de los rumiantes alimentados con dietas a base de granos. Se han desarrollado procesos para incrementar la tasa de digestión del almidón y el valor energético de los granos. Para cumplir con este objetivo se hace indispensable el uso de enzimas de origen orgánico como la Alfa-amilasa producidapor microorganismos como Bacillus licheniformis. Para ello se ha implementado el uso de estas enzimas in vitro a las 12 horas de la fermentación del almidón, donde cada bloque fue incubado con la enzima (Rubio et al 2001).
Como lo reporta Valenzuela et al (2001) la descomposición de la materia orgánica en el suelo es un proceso clave en el ciclaje de nutrientes en el ecosistema. Donde son...