Buenas Tareas

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NOVA - PUBLICACIÓN CIENTÍFICA - ISSN:1794-2470 VOL.4 No. 6 JUNIO - DICIEMBRE DE 2006:1-114
crecimiento fúngico; se mantuvieron en agitación a 120 rpm,por 30 minutos a temperatura ambiente (20° C).
Conteo preliminar de células viables
A

partir del homogenizado se determinó la concen-tración inicial de bacterias viables heterótrofas ydesnitrificantes de cada uno de los surcos mediantelatécnica de recuento por vertido en placa, previa prepa-ración de la muestra de suelo por homogenización y se-cado, según protocolo.
Recuento de desnitrificantes
A partir del homogenizado se prepararon dilucionesseriadas en base 10 en medio líquido mineral; (10
0
a 10
-7
);de cada dilución se inoculó, por triplicado, 0,1 ml a pla-cas de petri. Luego se agregaron 20 ml de medio agar mineralmínimo fundido y mantenido a 45
0
C. Una vezsolidificados los medios se llevaron a incubar a 37
0
Cdurante 48-96 horas, para obtener crecimiento de colo-nias. Para cuantificar las colonias se seleccionaron lasdiluciones que presentaron crecimiento entre 30 y 300UFC, se realizó el cálculo teniendo en cuenta el título dela dilución y la cantidad de inóculo utilizado. Los resulta-dos se expresanen UFC/g de suelo.
Aislamiento e identificación de consorciosdenitrificantes bacterianos nativos
A partir del crecimiento obtenido en las placas derecuento de desnitrificantes y heterótrofos se realizó elaislamiento de los consorcios bacterianos nativos me-diante resiembra en medio de sales minerales. Los cul-tivos se manipularon en iguales condiciones de creci-miento a las descritas para losrecuentos bacterianos yse realizaron las resiembras necesarias en medio sólidohasta obtener cepas puras. Las cepas puras componen-tes de los consorcios nativos se resembraron en mediosde cultivo de aislamiento primario básicos y con el fin deobtener el crecimiento suficiente para su completa iden-tificación y para mantenerlas viables.Los microorganismos aislados se determinaron segúnlosprotocolos convencionales de identificación: teniendoen cuenta las características macroscópicas de lascolonias, la morfología microscópica, por medio de latinción de Gram y coloraciones especiales para cápsula,esporas e inclusiones citoplasmáticas. Según lascaracterísticas micro y macroscópicas de las coloniasaisladas se procedió a la aplicación de los protocolosconvencionales y pruebas bioquímicasespeciales parala identificación de bacterias provenientes de suelo.
Resultados
Recuento Inicial de células viables:
1.3 x 10
4
UFC/g.de suelo. Una vez se observó crecimiento a partir de losaislamientos positivos se procedió a realizar caracteri-zación macro y microscópica de las colonias aisladas.El recuento promedio de UFC/g de suelo post-tratamientofue de 6.3x 10
4
, el recuento promedio enel surco con-trol fue de 2,6x10
4
.Identificación bioquímica. En la Tabla 1 se presentanlos microorganismos aislados e identificados mediantepruebas bioquímicas.
Tabla 1.
Microorganismos aislados e identificados mediante pruebasbioquímicas.

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La actividad desnitrificante (AD) del consorciobacteriano, fue demostrada mediante análisisfisicoquímicos observando medianteespectrofotometría,una disminución significativa de nitratos en las Unida-des experimentales (p£ 0.05) en relación al control des-pués de introducir el consorcio bacteriano, figura 1.
Discusión
El consorcio bacteriano identificado a partir del sue-lo problema estuvo compuesto por:
Bacillus megaterium,Bacillus licheniformis, Pseudomonas sp,Acinetobacter sp, Propionibacterium, Clostridium sp,Actinomyces.Peptoestreptococcus, Sthaphylococcus
coagulasa negativa
, Corynebacterium.
El recuento promedio de UFC/g de suelo post-trata-miento fue de 6.3x 10
4
y en el surco control fue de 2,6x10
4
.Utilizando todo el consorcio no se pudo determinar unaconcentración bacteriana óptima para la desnitrificación;por lo que se sugiere en futuros ensayos probar diferen-tes asociaciones bacterianas y diferentes...