Ca-Color

C

Ca-Color
Arsenazo III AA

Método colorimétrico directo para la determinación de
calcio en suero, plasma y orina

SIGNIFICACION CLINICA
El calcio es esencial en la mayoría de las reacciones de la
coagulación sanguínea y en la regulación de la excitabilidad
de las fibras musculares.
Su concentración en suero y orina está regulada por la acción de factores tales como niveles deparathormona, vitamina D y fósforo, observándose fluctuaciones fisiológicas debidas a edad, sexo, embarazo, actividad física, cambios
estacionales (por acción de la luz solar).
La hipercalcemia está relacionada con distintas patologías: hiperparatiroidismo, neoplasias óseas, intoxicaciones con vitamina D.
La hipocalcemia se asocia con desórdenes tales como hipoparatiroidismo, deficiencia de vitaminaD, malabsorción.
FUNDAMENTOS DEL METODO
El calcio reacciona con arsenazo III dando un complejo de
color azul que se mide fotocolorimétricamente a 650 nm.
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: solución de arsenazo III 100 mg/l y 8-hidroxiquinolina sulfonato 1,4 g/l en buffer Tris 100 mM, pH 8,5.
S. Standard*: solución de calcio 10 mg/dl.
REACTIVOS NO PROVISTOS
- Agua destilada o desionizada.- Calibrador A plus de Wiener lab. cuando se emplea la técnica automática. Puede también emplearse en calibración
de técnicas manuales.
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Reactivos Provistos: listos para usar.
Standard: cada vez que se use, transferir una cantidad en
exceso a un tubo limpio y pipetear de allí el volumen necesario, descartando el sobrenadante.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para usodiagnóstico "in vitro".
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Evitarla
exposición prolongada del Reactivo A a la luz directa.
* No provisto en todas las presentaciones

INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
La turbidez o decoloración del Reactivo A indica deterioro
del mismo, mientras que absorbancias del blanco mayor a
1,200 D.O. a 650 nm (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO), son indicio de contaminación con calcio. En ambos casos,desechar.
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado u orina
a) Recolección:
- Suero o plasma: obtener de la manera usual.
- Orina: recolectar orina de 24 horas sobre 20 ml de ácido
clorhídrico al 50%. Llevar a 2 litros con agua y homogeneizar.
b) Aditivos: en caso de utilizar plasma, se debe usar heparina como anticoagulante. Si la muestra a emplear es orina, se
debe acidificar con ácido clorhídricoal 50% durante su recolección.
c) Sustancias interferentes conocidas: los anticoagulantes distintos de la heparina, complejan al calcio produciendo
resultados erróneos. No interfieren: bilirrubina hasta 200 mg/l,
hemoglobina hasta 350 mg/dl, magnesio hasta 10 mg/dl, ni
triglicéridos hasta 500 mg/dl.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
d)Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
muestra debe ser preferentemente fresca. Puede conservarse una semana en refrigerador (2-10oC) o más de 5 meses en
el congelador, sin agregado de conservadores.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
- Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes
indicados.
- Tubos o cubetas espectrofotométricas.
-Cronómetro.
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 650 nm en espectrofotómetro o 620650 nm en fotocolorímetro.
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente (15-25oC).
- Tiempo de reacción: 2 minutos
- Volumen de muestra: 10 ul
- Volumen final de reacción: 1,01 ml
Los volúmenes de muestra y Reactivo A se pueden variar proporcionalmente (ej.: 20 ul de muestra + 2 ml de Reactivo A o...