calibracion

INTRODUCCION
La calibración del espectrofotómetro es algo más compleja. En la posición cero del aparato, el paso de luz está cerrado, por lo que la transmitancia debe ajustarse a cero. luego utilizando un blanco de aire, se debe ajustar la transmitancia a 100 en la posición meter del aparato.

Una vez hecho esto se introduce el cristal patrón y se comprueba a las longitudes de ondaestablecidas para dicho cristal, que la transmitancia es la correcta.

Obviamente, en el registro también anotaremos las lecturas de las absorbancias, el resultado de acuerdo con el criterio establecido, el fabricante, tipo de aparato, frecuencia del calibrado, patrón utilizado, etc.

Los espectrofotómetros, en general, son equipos muy especializados y costosos. su conservación depende en gran medida dela forma de instalación y de utilización. El medio ambiente que los rodea y la calidad de los servicios de electricidad constituyen factores de primordial importancia, para que los equipos puedan prestar los servicios de acuerdo con las especificaciones para los que fueron fabricados. Las rutinas de mantenimiento que puedan llegar a requerir varían en complejidad, van desde la limpieza cuidadosade sus componentes hasta procedimientos especializados, que sólo deben realizarlo técnicos.

MARCO TEORICO
Un espectrofotómetro es un instrumento usado en la física óptica que sirve para medir, en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones. También es utilizado en los laboratorios de química para lacuantificación de sustancias y microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotómetros, puede ser de absorción atómica o espectrofotómetro de masa.

Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones:

1. Dar información sobre la naturalezade la sustancia en la muestra
2. Indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia que nos interesa está presente en la muestra

El funcionamiento de un espectrofotómetro consiste básicamente en iluminar la muestra con luz blanca y calcular la cantidad de luz que refleja dicha muestra en una serie de intervalos de longitudes de onda. Lo más usual es que los datos se recojan en 31 intérvalosde longitudes de onda (los cortes van de 400 nm, 410 nm, 420 nm… 700 nm). Esto se consigue haciendo pasar la luz a través de un dispositivo monocromático que fracciona la luz en distintos intérvalos de longitudes de onda. El instrumento se calibra con una muestra o loseta blanca cuya reflectancia en cada segmento de longitudes de onda se conoce en comparación con una superficie de reflexión difusaperfecta.
el espectrofotómetro se basa en la “LAMBERT-BEER” también conocida como la ley de la absorción de la luz.
Ley de "Lambert-Beer"
es un medio matemático de expresar cómo la materia absorbe la luz. Esta ley afirma que la cantidad de luz que sale de una muestra es disminuida por tres fenómenos físicos:
1. La cantidad de material de absorción en su trayectoria (concentración)
2. Ladistancia que la luz debe atravesar a través de la muestra (distancia de la trayectoria óptica)
3. La probabilidad de que el fotón de esa amplitud particular de onda sea absorbido por el material (absorbencia o coeficiente de extinción)
Partes del espectrofotómetro
• Cubetas de espectrofotometría. En un primer plano, dos de cuarzo aptas para el trabajo con luz ultravioleta; en segundo plano, deplástico, para colorimetría (es decir, empleando luz visible).
• Fuente de luz La fuente de luz que ilumina la muestra debe cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad, direccionabilidad, distribución de energía espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son: lámpara de wolframio (también llamado tungsteno), lámpara de arco de xenón y lámpara de deuterio que es utilizada en...