Calorimetria

Calorimetría de Titulación
Isotérmica (ITC) 
“Applications of isothermal titration calorimetry in protein science”
State Key Laboratory of Virology, College of Life Sciences, WuhanUniversity, Wuhan 430072, China
Acta Biochim Biophys Sin (2008): 565‐576
“Isothermal Titration Calorimetry of Protein‐Protein Interactions”
Michael M. Pierce, C. S. Raman,1 and Barry T. Nall2METHODS 19, 213‐221 (1999)

Qué es ITC?
Es una medida directa del calor generado o 
absorbido cuando las moléculas interactúan.
Calorimetría: el equipo mide directamente el calor de interacción liberado o absorbido.
Titulación: el experimento se obtiene llevando a cabo una 
serie de inyecciones de alícuotas de solución de sustrato a 
un volumen constante de solución de receptor. Isotérmica: cada vez que una alícuota es inyectada y existe 
interacción, se manifiesta un cambio de temperatura; 
cuando se llega al equilibrio de la interacción, el equipo 
vuelve a su temperatura inicial.Aplicaciones
La ITC pone de manifiesto interacciones 
intermoleculares de  interés bioquímico: 
•proteína‐ligando, 
•proteína‐proteína
•proteína‐lípido
•proteína‐carbohidrato•proteína‐ADN/ARN

Instrumento
Jeringa 
conteniendo 
el sustrato 

Celda de 
referencia

Potencia 
constante 
aplicada a 
la celda de 
referencia

Celda de reacción 
conteniendo el receptorPotencia de 
respuesta 
aplicada a 
la celda de 
reacción

Como funciona?
Un experimento convencional en ITC consiste en:




Colocar un determinado volumen de solución de receptor en la celda de reacción. 
Inyectar la solución de sustrato, cada un intervalo de tiempo 
suficiente para llegar al equilibrio. 
Durante el experimento, una pequeña potencia constante, se disipa en la  celda de referencia y activa el sistema de 
compensación que iguala las temperaturas de las dos celdas 
y produce la línea base experimental. Un efecto exotérmico ...