cap 13 biologia celular y molecular de karp

REPLICACION DE ADN
REPLICACION PROCARIOTA (bacterias ADN circular)
Horquilla de replicacion: punto en el que el par de segmentos replicados se une con los segmentos no replicados.
Sitio donde la doble hélice se separa
Sitio donde los nucleótidos se incorporan en las cadenas complementarias.
Comienza en un sitio especifico ORIGEN en E. coli se llama oriC.
Las dos horquillas de separación semueven en direcciones opuestas hasta llegar al punto donde está el origen y concluye la replicacion.
Las cadenas replicadas se separan la una de la otra y se dividen en dos celulas diferentes.
DESENROLLAMIENTO DEL DUPLEX Y SEPARACION DE LAS CADENAS.
Movimiento de la horquilla de separación produce una Molécula de ADN sobreenrollada => superenrollamiento positivo en la porción no replicada del ADN.TOPOISOMERASA: enzimas que cambian el estado de superenrollamiento del ADN.
ADN GIRASA: topoisomerasa del tipo II libera la tención mecánica que se origina cuando se replica E. coli. Esta corta el dúplex por delante de la horquilla de replicacion, un segmento de ADN pasa a través de la rotura de la doble hélice hacia el otro lado ligando los cortes. Esto se hace por la liberación de energía durantela hidrolisis de ATP.
PROPIEDADES DE LAS ADN POLIMERASAS (completa una cadena incompleta?)
ADN POLIMERASAS: enzimas que sintetizan nuevas cadenas de ADN.
-ADN monocatenario circular no sirve como plantilla para la ADN POLIMERASA xq la enzima no puede iniciar la formación de una cadena
- DNA polimerasas necesitan una cadena de DNA plantilla y una cadena iniciadora que sea OH 3´ terminal(iniciador).
DNA polimerasa I: enzima que replica el ADN bacteria contiene de 300 a 400 moléculas de DNA polimerasa I.
DNA polimerasa III principal enzima que replica el ADN bacterias contienen 10 copias.

No pueden iniciar las cadenas de ADN ni construir cadenas en dirección 3´=> 5´
REPLICACION SEMIDESCONTINUA
No se puede sintetizar cadenas de ADN en dirección 3´-5´
Ambas cadenas se ensamblanen dirección 5´-3´ es decir que en la plantilla toman la dirección 3´->5´
En consecuencia una de las cadenas crece en dirección del asa de replicacion donde las cadenas de ADN parental se separan, mientras la otra cadena crece y se aleja de la horquilla.
Cadena que crece en dirección a la horquilla: SINTESIS CONTINUA DE NUCLEOTIDOS LLAMADA CADENA ADELANTADA...
Cadena que crece alejándose de lahorquilla: SINTESIS DISCONTINUA, EN FRAGMENTOS, LLAMADA CADENA RETRASADA.
Ambas cadenas se sintetizan simultáneamente, pero su replicacion es semidiscontinua.
FRAGMENTOS DE OKAZAKI: una porción de ADN que se construyó en pequeños segmentos que se ligaron con rapidez a piezas mucho más grandes sintetizadas con anterioridad.
DNA LIGASA: enzima que une los fragmentos de Okazaki.
PRIMASA: ARNpolimerasa que sintetiza una cadena corta de ARN en el extremo 5´de la cadena adelantada y en el extremo 5´de los fragmentos de okazaki. La formación de esta cadena corta de ADN elimina la inclusión de bases erróneas
El fragmento corto de ARN sirve como iniciador que se requiere para la síntesis de ADN por medio de una ADN polimerasa.
Luego la primasa se elimina y los espacios resultantes en la cadena sellenan y se ligan por medio de la ADN LIGASA.
MAQUINARIA QUE OPERA EN LA HORQUILLA DE REPLICACION
El desenrollamiento del dúplex y la separación de las cadenas requieren la ayuda de dos proteínas que se unen al ADN:
HELICASA: enzima que desenrolla el ADN. Desenrollan el dúplex del ADN en una reacción que utiliza energía liberada a partir de la hidrolisis de ATP para separar los puentes dehidrogeno que mantienen juntas a las cadenas dando como resultado las plantillas de ADN monocatenario.
E. coli: 12 distintas helicasas. Helicasa DnaB tiene 6 subunidades estructuradas que forman una proteina en forma de anillo, el cual encierra a una cadena de ADN. La replicacion comienza cuando copias múltiples de DnaA se unen al origen de replicacion oriC y separan (melt) las cadenas de ADN en ese...