Caracteristicas bioquimicas

características METABOLICAS
PRUEBAS BIOQUIMICAS Con frecuencia la identificación de una especie requiere que se conozca de manera detallada su actividad bioquímica, ya que otras características no son suficientemente distintivas. En el laboratorio se disponen de numerosas tánicas para la caracterización bioquímica de una especie. Además de los productos finales de los procesos metabólicos,también se necesita conocer cono detalle como se producen estos cambios, como ocurren paso a paso las reacciones químicas, cuales son las enzimas que intervienen y sus productos intermedios. En general el microorganismo se cultiva en medios que contiene una sustancia nutritiva específica o sustrato, y después de la incubación se examinará para ver los cambios bioquímicos que hayan ocurrido Algunas delas pruebas bioquímicas mas usadas están las siguientes: Fermentación de la lactosa (Mc Conkey), Agar Hierro de Kliger (KIA), Prueba del Indol, Citrato de Simmons, Agar Hierro Lisina (LIA), Agar Urea de Christiansens, Prueba de la Fenilalanina (PPA), Reducción de los Nitratos, Movilidad, RM - VP · Oxidasa y Catalasa  Fermentación de la lactosa (Mc Conkey) El agar Mc Conkey es un medio sólido,diferencial y selectivo. Se usa para la discriminación de bacterias con capacidad de fermentar la lactosa (Lac + y -).Composición g/l : - Peptona 20.0 : fuente de nitrógeno y carbono para las Lac -. - Lactosa 10.0 : fuente de carbono para las Lac +. - Sales biliares 2.5 : le confiere carácter selectivo, inhibiendo el crecimiento de Gram +. - Cloruro sódico 5.0 : para mantener la tonicidad del medio(evitar osmosis). - Rojo neutro 0.05 : indicador que va hacer que el medio vire de coloración. Si las bacterias son Lac +, producirán ácidos derivados de la fermentación que darán al medio un aspecto rosáceo; si por el contrario son Lac -, el medio se basificará por el uso de la peptona y se tornará amarillo. - Cristal violeta 0.001 : interfiere junto con las sales biliares en la selectividad delmedio. - Agar-agar 15.0: da consistencia al medio.

Lac (+)

Lac (-)

 Agar Hierro de Kliger (KIA) Es un medio de cultivo selectivo usado en microbiología de alimentos para diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa y lactosa y a la producción de acido sulfhídrico. Fórmula (en gramos por litros) Instrucciones Peptona de carne 13.0 Cloruro de sodio 5.0 Lactosa 10.0Tripteína 10.0 Glucosa 1.0 Citrato de hierro y amnio 0.5 Tiosulfato de sodio 0.3 Rojo de fenol 0.025 Agar 15.0 pH final: 7.3 En el medio de cultivo, la peptona de carne y la triteína aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo de las bacterias; la lactosa y la glucosa son los hidratos de carbono fermentables; el tiosulfato de sodio es el sulfato necesario para la producción de H2S, elcitrato de hierro y amonio, es la fuente de iones de Fe+3, los cuales se combinan con el acido sulfhídrico y producen sulfuro de hierro, de color negro.

El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantienen el balance osmótico y el agar es el agente solidificante. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrogeno el cual reacciona luego con una sal de hierro, produciendoel típico sulfuro de hierro de color negro. RESULTADOS: 1. Pico alcalino/fondo acido ( pico rojo/fondo amarillo) el microorganismo solo fermenta la glucosa 2. Pico acido/fondo acido ( pico amarillo/fondo amarillo) el microorganismo fermenta la glucosa y lactosa 3. Pico alcalino/fondo alcalino ( pico rojo/fondo rojo) el microorganismo es no fermentador de azucares 4. La presencia de burbujas, oruptura del medio de cultivo, indica que el microorganismo produce gas 5. El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce acido sulfhídrico H 2S

 Prueba del Indol Pone de manifiesto la presencia de la encima Triptofanasa en nuestras bacterias, si esta presente degradará el triptofano y liberará al medio Indol, para revelar su presencia usaremos el reactivo de Kovac; si hay...