Caracterización Y Análisis De Hidratos De Carbono Mediante El Método De Cromatografía En Capa Fina
Páginas: 5 (1122 palabras)
Publicado: 21 de abril de 2012
Objetivos
Objetivos Generales
Caracterizar e identificar hidratos de carbono por el método de Cromatografía en Capa Fina (TLC).
Objetivos específicos
1) Sobre la base de los parámetros de Forma, Color y Rf, caracterizar soluciones estándares de hidratos de carbono por aplicación de la cromatografía en capa fina.
2) Identificar el hidrato de carbono presente en una muestraproblema de acuerdo a los parámetros utilizados en la caracterización de las soluciones estándares.
Procedimiento experimental
1. Se trazó una línea recta con lápiz grafito a 2cm de uno de los bordes de la cromatoplaca y se realizó cinco marcas equidistantes.
2. Se depositó sobre cada marca asignada una alícuota de 3uL de la solución estándar respectiva y de la muestra problema, utilizandouna micropipeta P-20.
3. Se agregó 100 ml de la solución de corrida a un vaso de precipitado de 1L.
4. Luego se introdujo la placa en el vaso de precipitado, de forma tal que el borde tomado como referencia para trazar la línea y puntos demarcatorios, contactando el fondo del vaso de manera uniforme y sin inclinaciones.
5. Se espero el avance del solvente porcapilaridad, hasta que el frente llegó a unos pocos centímetros del borde superior.
6. Se sacó la placa para dejarla secar en la estufa regulada a 100ºC por 5-10 minutos, manteniendo la puerta de la estufa semi abierta.
7. Después se retiró la cromatoplaca desde la estufa y se roció bajo campana con la solución de revelado.
8. Se dejó la placa en posición vertical para eliminar el exceso desolución de
revelado.
9. Ya eliminado el exceso de revelado se colocó la placa en la estufa a 100ºC durante 10-15 minutos con monitorización constante.
10. Con la placa ya seca, se registró los colores, la forma y la distancia (cm) de
migración desde el origen, para cada una de las manchas generadas por las
muestras.
11. Finalmente se calculó los Rf para cada uno delos estándares y de la muestra del azúcar desconocido.
Cálculos y resultados
Imagen de la cromatografía
Ficha
Gráfico
Gráfico: Muestra los diferentes hidratos de carbono según su peso molecular, donde la muestra NN se encuentra entre los disacáridos.
Discusión de resultados
Los hidratos de carbono son macromoléculas, están constituidas por Carbono, hidrogeno y oxigeno.Son conocidas como moléculas combustibles porque aportan energía.
Se clasifican en monosacáridos, disacáridos y oligosacáridos (de 10 a 19 moléculas) y polisacáridos (más de 20 moléculas).
Monosacáridos
Son compuestos orgánicos formados por una sola cadena de carbono no hidrolizable, químicamente se definen como polialcoholes con un grupo aldehído (aldosas) representado por el gliceraldehidoy cetona (cetosas) representado por la Dehidroxicetona.
Existen dos tipos de monosacáridos importantes, las pentosas conformadas por 5 átomos de carbono y las hexosas conformada por 6 átomos de carbono.
Pentosas
La ribosa (150,13 g/ mol.) es un monosacárido de 5 átomos de carbono, es decir una pentosa .Proviene de la eritrosa, parte de la familia de las aldosas. Su formula es C5H10O5. Sonimportantes en la formación de nucleótidos ARN.
La Arabinosa (150.13 g/mol)y la xilosa ( 150.13 g/mol) son aldopentosas, pero la primera proviene de eritrosa y la xilosa de la treosa. Ambas aldopentosas contribuyen a la formación de polisacáridos.
La xilosa tiene el isómero funcional llamada xilulosa, es un hexágono pirano y se puede encontrar en vegetales, madera, paja y formando parte detejidos conectores de los órganos, lo cual cumple funciones alimenticias. Su enantiómero más común es D-xilosa.
La arabinosa constituye en la hemicelulosa y la pectina, su enantiómero más común es la L-arabinosa.
Hexosas
Glucosa (180.1 g/mol) es un monosacárido de 6 átomos cuya formula molecular es C6H12O6. Es una aldosa, es decir, tiene un grupo carbonilo al extremo de la molécula. Se puede...
Objetivos Generales
Caracterizar e identificar hidratos de carbono por el método de Cromatografía en Capa Fina (TLC).
Objetivos específicos
1) Sobre la base de los parámetros de Forma, Color y Rf, caracterizar soluciones estándares de hidratos de carbono por aplicación de la cromatografía en capa fina.
2) Identificar el hidrato de carbono presente en una muestraproblema de acuerdo a los parámetros utilizados en la caracterización de las soluciones estándares.
Procedimiento experimental
1. Se trazó una línea recta con lápiz grafito a 2cm de uno de los bordes de la cromatoplaca y se realizó cinco marcas equidistantes.
2. Se depositó sobre cada marca asignada una alícuota de 3uL de la solución estándar respectiva y de la muestra problema, utilizandouna micropipeta P-20.
3. Se agregó 100 ml de la solución de corrida a un vaso de precipitado de 1L.
4. Luego se introdujo la placa en el vaso de precipitado, de forma tal que el borde tomado como referencia para trazar la línea y puntos demarcatorios, contactando el fondo del vaso de manera uniforme y sin inclinaciones.
5. Se espero el avance del solvente porcapilaridad, hasta que el frente llegó a unos pocos centímetros del borde superior.
6. Se sacó la placa para dejarla secar en la estufa regulada a 100ºC por 5-10 minutos, manteniendo la puerta de la estufa semi abierta.
7. Después se retiró la cromatoplaca desde la estufa y se roció bajo campana con la solución de revelado.
8. Se dejó la placa en posición vertical para eliminar el exceso desolución de
revelado.
9. Ya eliminado el exceso de revelado se colocó la placa en la estufa a 100ºC durante 10-15 minutos con monitorización constante.
10. Con la placa ya seca, se registró los colores, la forma y la distancia (cm) de
migración desde el origen, para cada una de las manchas generadas por las
muestras.
11. Finalmente se calculó los Rf para cada uno delos estándares y de la muestra del azúcar desconocido.
Cálculos y resultados
Imagen de la cromatografía
Ficha
Gráfico
Gráfico: Muestra los diferentes hidratos de carbono según su peso molecular, donde la muestra NN se encuentra entre los disacáridos.
Discusión de resultados
Los hidratos de carbono son macromoléculas, están constituidas por Carbono, hidrogeno y oxigeno.Son conocidas como moléculas combustibles porque aportan energía.
Se clasifican en monosacáridos, disacáridos y oligosacáridos (de 10 a 19 moléculas) y polisacáridos (más de 20 moléculas).
Monosacáridos
Son compuestos orgánicos formados por una sola cadena de carbono no hidrolizable, químicamente se definen como polialcoholes con un grupo aldehído (aldosas) representado por el gliceraldehidoy cetona (cetosas) representado por la Dehidroxicetona.
Existen dos tipos de monosacáridos importantes, las pentosas conformadas por 5 átomos de carbono y las hexosas conformada por 6 átomos de carbono.
Pentosas
La ribosa (150,13 g/ mol.) es un monosacárido de 5 átomos de carbono, es decir una pentosa .Proviene de la eritrosa, parte de la familia de las aldosas. Su formula es C5H10O5. Sonimportantes en la formación de nucleótidos ARN.
La Arabinosa (150.13 g/mol)y la xilosa ( 150.13 g/mol) son aldopentosas, pero la primera proviene de eritrosa y la xilosa de la treosa. Ambas aldopentosas contribuyen a la formación de polisacáridos.
La xilosa tiene el isómero funcional llamada xilulosa, es un hexágono pirano y se puede encontrar en vegetales, madera, paja y formando parte detejidos conectores de los órganos, lo cual cumple funciones alimenticias. Su enantiómero más común es D-xilosa.
La arabinosa constituye en la hemicelulosa y la pectina, su enantiómero más común es la L-arabinosa.
Hexosas
Glucosa (180.1 g/mol) es un monosacárido de 6 átomos cuya formula molecular es C6H12O6. Es una aldosa, es decir, tiene un grupo carbonilo al extremo de la molécula. Se puede...
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