CARACTERIZACION DE PROTEINAS MEDIANTE REOLOGIA


CARACTERIZACION DE PROTEINAS MEDIANTE REOLOGIA
Objetivo:
Demostrar que la reología puede funcionar como herramienta para la caracterización de la estabilidad de proteínas a través de la mediciónde los cambios de viscosidad durante la desnaturalización térmica.
Antecedentes:
Las proteínas son largas cadenas de aminoácidos que siguen una secuencia determinada, generalmente, sus estructurasson tridimensionales, sus diferentes compuestos y enlaces entre estos es lo que mantiene a la proteína estable.
El uso terapéutico de las macromoléculas proteicas se ha incrementado gracias a lahabilidad que sus aminoácidos tienen ya que al interactuar con otras moléculas los enlaces de hidrogeno le dan estabilidad.
La inmunoglobulina es un tipo de proteína de uso terapéutico y de sondas, ya quetiene la capacidad de combinarse con otros fluidos debido a su estructura tridimensional en forma de Y. Dicha estructura le permite adherirse a otros fluidos o sustancias extrañas.
Para que estetipo de funciones se realicen con éxito es necesario que la proteína conserve su forma original, en la que es más estable. Lo que ha generado gran interés en la estabilidad de proteínas, tratando decomprender su función como excipientes en su estructura de tipo terciaria plegada.
Para medir la estabilidad de las proteínas de manera cuantitativa se toma como parámetro a la temperatura de fusión.Para ello existen muchas técnicas de laboratorio entre las cuales se encuentran el DSC (Calorimetría de Barrido Diferencial), FTIR el Espectroscopio Infrarrojo y el Dicroísmo Espectroscópico deFourier. La reología ha demostrado ser, por excelencia, la mejor técnica para medir la estabilidad; ya que mide la resistencia a fluir de los líquidos, que cambia cuando la proteína se despliega o haycambios de temperatura. Incluso si la disolución está muy diluida, se puede apreciar sin problema el cambio de viscosidad. Lo que nos otorga una ventaja grande a la hora de observar la temperatura de...