Carotenos pimenton
Páginas: 5 (1203 palabras)
Publicado: 23 de agosto de 2014
AISLAMIENTO, PURIFICACIÓN E IDENTIFICACIÓN DE CAROTENOIDES PRESENTES EN EL PIMENTÓN (Capsicum annuum ) POR CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA Y ESPECTROSCOPÍA EN EL U.V
LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA
DOCENTE
NORA JIMENEZ
Grupo: 22
UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
FACULTAD DE QUÍMICA FARMACÉUTICA
QUÍMICA FARMACÉUTICA
MEDELLÍN
2013
DATOS Y RESULTADOS.
Muestra
Ajípimentón (30.3 gr)
Nombre científico
Capcicum annuum
Parte utilizada
Fruto
Familia
solanaceae
Carotenoides a identificar
Capsantina y capsorubina
En la selección del eluente más adecuado se obtuvo los siguientes resultados:
El criterio para seleccionar el mejor eluente era aquel que presentara mayor separación de bandas, en este caso el que presentó mejor separación fue n-hexano/acetato de etilo 2:1. Una vez escogido el eluente se procedió a concentrar el extracto mediante la técnica de rota evaporación, luego de eso se sembró la placa de cromatografía en capa fina con el eluente ya escogido.
El RF de la placa 2:1 fue el siguiente:
El RF que presentó esa placa se consideró apto para proseguir con la cromatografía, se realizaron dos placas ya que había dos gruposdiferentes con la misma muestra, sin embargo un grupo tenía una muestra más madura que la otra, una con la cual presentó estos resultados:
Cromatografía en capa fina.
En estas placas que se realizaron con el eluente escogido (n-hexano/acetato de etilo 2:1) se pueden apreciar la formación de varias bandas que corresponden a varios carotenoides y una gran variedad de compuestos, la mayoríadesconocidos pero se pueden inferir varios de ellos. Para realizar la determinación del espectro se escogió la placa B de la figura 2.
La banda de interés, en este caso la que se encuentra en la parte superior delineada, presentó el siguiente RF.
Esta misma banda se raspó y se disolvió en hexano y se determinó su espectro UV el cual presentó el siguiente resultado:
DISCUSIÓN.
Elcolor es la primera sensación que se percibe en un alimento, y estos son dados, entre otros compuestos, por los carotenoides; en este caso, el pimentón rojo (Capcicum annuum), posee gran cantidad de estos, con predominiode capsantina y capsorubina que aportan cerca del 60% de los carotenoides totales y son los responsables del color rojo de esta fruta (1), esta práctica estuvo centrada en laextracción, separación, purificación e identificación del carotenoide predominante, en este caso la capsantina.
Luego de haber hecho todo el procedimiento específico para aislar el extracto, se procedió a escoger el mejor eluente a través de una serie eluotrópica que consistió en sembrar en varias placas cromatográficas de capa fina el extracto concentrado e introducirlas en varios solventes, eneste caso correspondían a (hexano, n-hexano/acetato de etilo 4:1, n-hexano/acetato de etilo 2:1, n-hexano/acetato de etilo 1:2, n-hexano/acetato de etilo 1:4, acetato de etilo), del cual, el que evidenció mejor separación fue 2:1, aunque la literatura nos reportaba que el eluente utilizado para la cromatografía correspondía al eluente 4:1(2) , he aquí donde empezó una controversia, puesto que setenía la duda en seguir el criterio reportado teóricamente o si por el contrario basarse en el criterio propio.
Se decidió someter las dos placas (2:1(1) y 4:1(2)) a la luz ultravioleta para así poder visualizar con mayor exactitud las bandas y por ende la separación, cabe mencionar que la literatura nos dice que la luz UV degrada los pigmentos lentamente y a medida que aumenta la intensidad oexposición. Esto se debe a que los dobles enlaces conjugados de las moléculas de carotenoides son muy reactivos degradándose por la presencia de oxígeno del medio (3).
Se resolvió tomar el segundo eluente ya que este era el que estaba reportado. Con la fase móvil ya escogida se procedió a preparar la CCF pero con esta fase no se presentó una buena separación en esta cromatografía, se decidió...
LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA Y FITOQUÍMICA
DOCENTE
NORA JIMENEZ
Grupo: 22
UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
FACULTAD DE QUÍMICA FARMACÉUTICA
QUÍMICA FARMACÉUTICA
MEDELLÍN
2013
DATOS Y RESULTADOS.
Muestra
Ajípimentón (30.3 gr)
Nombre científico
Capcicum annuum
Parte utilizada
Fruto
Familia
solanaceae
Carotenoides a identificar
Capsantina y capsorubina
En la selección del eluente más adecuado se obtuvo los siguientes resultados:
El criterio para seleccionar el mejor eluente era aquel que presentara mayor separación de bandas, en este caso el que presentó mejor separación fue n-hexano/acetato de etilo 2:1. Una vez escogido el eluente se procedió a concentrar el extracto mediante la técnica de rota evaporación, luego de eso se sembró la placa de cromatografía en capa fina con el eluente ya escogido.
El RF de la placa 2:1 fue el siguiente:
El RF que presentó esa placa se consideró apto para proseguir con la cromatografía, se realizaron dos placas ya que había dos gruposdiferentes con la misma muestra, sin embargo un grupo tenía una muestra más madura que la otra, una con la cual presentó estos resultados:
Cromatografía en capa fina.
En estas placas que se realizaron con el eluente escogido (n-hexano/acetato de etilo 2:1) se pueden apreciar la formación de varias bandas que corresponden a varios carotenoides y una gran variedad de compuestos, la mayoríadesconocidos pero se pueden inferir varios de ellos. Para realizar la determinación del espectro se escogió la placa B de la figura 2.
La banda de interés, en este caso la que se encuentra en la parte superior delineada, presentó el siguiente RF.
Esta misma banda se raspó y se disolvió en hexano y se determinó su espectro UV el cual presentó el siguiente resultado:
DISCUSIÓN.
Elcolor es la primera sensación que se percibe en un alimento, y estos son dados, entre otros compuestos, por los carotenoides; en este caso, el pimentón rojo (Capcicum annuum), posee gran cantidad de estos, con predominiode capsantina y capsorubina que aportan cerca del 60% de los carotenoides totales y son los responsables del color rojo de esta fruta (1), esta práctica estuvo centrada en laextracción, separación, purificación e identificación del carotenoide predominante, en este caso la capsantina.
Luego de haber hecho todo el procedimiento específico para aislar el extracto, se procedió a escoger el mejor eluente a través de una serie eluotrópica que consistió en sembrar en varias placas cromatográficas de capa fina el extracto concentrado e introducirlas en varios solventes, eneste caso correspondían a (hexano, n-hexano/acetato de etilo 4:1, n-hexano/acetato de etilo 2:1, n-hexano/acetato de etilo 1:2, n-hexano/acetato de etilo 1:4, acetato de etilo), del cual, el que evidenció mejor separación fue 2:1, aunque la literatura nos reportaba que el eluente utilizado para la cromatografía correspondía al eluente 4:1(2) , he aquí donde empezó una controversia, puesto que setenía la duda en seguir el criterio reportado teóricamente o si por el contrario basarse en el criterio propio.
Se decidió someter las dos placas (2:1(1) y 4:1(2)) a la luz ultravioleta para así poder visualizar con mayor exactitud las bandas y por ende la separación, cabe mencionar que la literatura nos dice que la luz UV degrada los pigmentos lentamente y a medida que aumenta la intensidad oexposición. Esto se debe a que los dobles enlaces conjugados de las moléculas de carotenoides son muy reactivos degradándose por la presencia de oxígeno del medio (3).
Se resolvió tomar el segundo eluente ya que este era el que estaba reportado. Con la fase móvil ya escogida se procedió a preparar la CCF pero con esta fase no se presentó una buena separación en esta cromatografía, se decidió...
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