Catalasa

Universidad de Sonora
Departamento de Ciencias Químico-Biológicas

Asignatura:
Laboratorio de Bioquímica II.

Profesor:
Teo. Ana Gloria Andrade Arteaga.
Lab. Rafael Canett Romero.

Título de la práctica:
“Catalasa”.

Alumnos:
Espinoza López Gustavo.
Figueroa Meza César Víctor.
Mazón Méndez Mauricio.

Hermosillo, Sonora. Martes 14 de Febrero del 2012.
INTRODUCCIÓNEl estudio de las enzimas, considerado trabajo netamente bioquímico, tuvo su auge a partir de los 50’s del siglo pasado, tras haber surgido el problema de cómo nombrarlas y clasificarlas; entre los principios generales considerados para su clasificación están:
a) En base a la reacción que catalizan
b) Tipo de reacción y nombre del sustrato
Así fue como, además de la aceptacióndel nombre común o recomendado se optó por el sistemático que considera 6 grupos de enzimas:
1.- Oxidorreductasas. Enzimas que catalizan reacciones redox. Las oxidorreducciones se consideran como transferencia de hidrógeno de un sustrato que se oxida a un aceptor que se reduce.
2.- Transferrasas. Enzimas que transfieren grupos de un compuesto donador a otro aceptor.
3.- Hidrolasas. Enzimas querompen hidrolíticamente uniones C-O, C-N, C-C y otros tipos de unión.
4.- Liasas. Enzimas que rompen uniones C-C, C-O, C-N, por eliminación dejando dobles ligaduras o añadiendo grupos a dobles ligaduras.
5.- Isomerasas. Enzimas que catalizan cambios geométricos o estructuralmente dentro de una molécula.
6.- Ligasas. Enzimas que catalizan la unión de dos moléculas acopladas a la hidrólisis de unaunión pirofosfato del ATP u otro trifosfato. Con frecuencia la unión formada es de lata energía.
Para la práctica, se estudia y experimenta la Catalasa contenida en la sangre humana, enzima que utiliza al peróxido de hidrógeno como oxidante para destruir el peróxido de hidrógeno, producto de varias oxidaciones biológicas, por ejemplo:
H2O2+ H2O2catalasa O2+ 2H2O
La enzima, comúnmentedistribuida en las células aerobias tiene un peso molecular de 250 mil, con 4 grupos heme y un átomo de hierro en el centro de cada heme. El mecanismo de reacción es a través de la formación de un complejo Catalasa-Peróxido de Hidrógeno.
OBJETIVO
* Observar y comprobar la actividad enzimática de la catalasa, utilizando sangre como fuente de obtención y a su vez, comprobar la actividadinhibidora de las altas temperaturas y compuestos químicos.

MATERIALES Y MÉTODOS
MATERIAL
* 1 Gradilla
* 1 Vaso de precipitados de 500ml
* 1 Vaso de precipitados de 250ml
* 4 pipetas de 5ml
* 9 tubos de ensaye de 15x150
* 1 Pinzas para tubo de ensaye
* 1 Mechero
* 1 Tripié
* 1 Tela de asbesto
* 1 Encendedor
PROCEDIMIENTO
1. En una gradilla coloque los 4tubos de ensaye enumerados del 1 al 4
2. Agregué 5 gotas de Cianuro de sodio al 5% al tubo No.3
3. Agregué 5 gotas de nitrato de plomo al 5% al tubo No.4
4. En un tubo de ensaye aparte, tome 3 ml sangre diluida 1:50, y caliéntelos en agua hirviendo por cinco minutos. Agréguelo al tubo No. 2
5. Añada 3ml de sangre diluida a los tubos 1,3 y 4
6. Pipetee 2.0ml de peróxido deHidrogeno al 3% a cada uno de los cuatro tubos
7. Agite suave pero rápidamente y lleve los tubos a baño de agua a 37°C.
8. Déjelos estar por 5 minutos, haga sus observaciones y anote sus resultados.

RESULTADOS

CARACTERÍSTICAS | #1 | #2 | #3 | #4 |
| SANGRE 1:50 | SANGRE 1:50 + CALOR | SANGRE 1:50 + CIANURO | SANGRE 1:50 + PbNO3 |
INHIBIDOR | N/A | CALOR | CIANURO DE SODIO | NITRATO DEPLOMO |
OBSERVACIONES Y RESULTADOS DESPUES DE AGREGAR H202 |
AL MOMENTO | HACE ESPUMA DE MANERA MODERADA Y CONSTANTE. | AUNQUE SE MUESTRA UN POCO DE ESPUMA NO SE PRESENTA LA FORMACIÓN CONTÍNUA DE ELLA. | SE OBSERVA UN POCO MAS ESPUMA FORMADA QUE LA MUESTRA #1 | ESTA HACIENDO MUCHA ESPUMA, SE VE MAYOR VOLÚMEN DE ELLA Y SIGUE FORMANDO. |
COLOR | ROJO CARMÍN | CAFÉ CLARO GRISÁCEO | ROJO...