celula madre
en un conjunto heterogéneo de secuencias.
Aislamiento, amplificación, secuenciación y expresión de un fragmento de DNA específicoPropiedad básica del DNA que permite su manipulación:
El acoplamiento de cadenas por complementariedad. La extraordinaria especificidad del reconocimiento entre secuencias de basescomplementarias constituye un poderoso instrumento para la identificación, aislamiento, clonación,... De fragmentos de DNA complementarios a uno dado
Obtención de la secuencia que se clona
Un genAislamiento a partir del mRNA (ya no tiene intrones): uso de la transcriptasa inversa que hace cDNA (por ejemplo, 1982 primera insulina humana recombinante en bacterias)
Síntesis automatizada de DNA invitro: a partir de la secuencia aminoacídica se puede hacer DNA con la ayuda del código (no región promotora ni controladora de la expresión) ~100bp
Fragmentos del genoma por digestión con enzimas derestricción (aleotoria o perdigonada, Shotgun)
Se obtiene genoteca, juego completo fragmentos clonados del genoma del organismo
Electroporación: se usa corriente eléctrica para introducir DNALiposomas: DNA se encapsula en liposomas (vesículas de membrana artificial)
Biolística (mitocondrias y cloroplastos): disparo de proyectiles de tungsteno recubiertos por DNA
Plásmidos (Ti deAgrobacterium tumefaciens en plantas) y elementos móviles (Elemento P en Drosophila)
Electroporación: se usa corriente eléctrica para introducir DNA
Liposomas: DNA se encapsula en liposomas (vesículasde membrana artificial)
Biolística (mitocondrias y cloroplastos): disparo de proyectiles de tungsteno recubiertos por DNA
Plásmidos (Ti de Agrobacterium tumefaciens en plantas) y elementosmóviles (Elemento P en Drosophila)
Electroporación: se usa corriente eléctrica para introducir DNA
Liposomas: DNA se encapsula en liposomas (vesículas de membrana artificial)
Biolística...
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