Celulas competentes

¿ como se generan las células competentes?

Esta capacidad es una propiedad determinada genéticamente, sin embargo no todas las células, poseen competencia natural por lo queexiste la competencia inducida.
La competencia natural se da cuando una bacteria es capaz de tomar una molécula de ADN sin necesidad de alterar su medio, razón por la cualrecibe su nombre debido a que se da en condiciones naturales del medio en el que se encuentra la bacteria, sin embargo la competencia natural solo ocurre en algunas bacterias comoAcinetobacter, Azotobacter, Bacillus entre otras.
Por otro lado las que no cuentan con estas características deben ser convertidas en permeables de forma pasiva, a través decondiciones que normalmente no ocurren en la naturaleza, para ello las células son enfriadas en presencia de cationes divalentes como Ca+2 que prepara las membranas celulares paraser permeables al ADN plasmidal. Las células son incubadas en hielo con el ADN y luego darles brevemente un shock térmico lo que causa que el ADN entre en la célula. Éste métodofunciona muy bien en ADN plasmidial circular. Una excelente preparación de células competentes entrega aproximadamente 108 colonias por microgramo de plasmidio. Una pobrepreparación entrega aproximadamente 104μg o menos. Buenas preparaciones no comerciales debiesen arrojar 105 a 106 transformantes por microgramo de plasmidio.
La electroporación es otramanera de crear agujeros en células bacterianas, mediante golpes de electricidad en un campo eléctrico de 10-20kV/cm. El ADN plasmidial puede entrar en la célula a través deésos agujeros. Se aconseja usar éste método con ADN plasmidial de gran tamaño. Los mecanismos de reparación de membrana, cerrará rápidamente estos agujeros después del shock.