celulas

Células
 Competentes
 y
 
Geno0pos
 

Ingeniería
 Gené,ca
 
2013
 

Recordar:
•  La clonación tiene como objetivo la producción de un gran número
de copias de unaregión de DNA o cDNA, clonación celular.
•  Esta clonación se basa en la realización de múltiples rondas de
replicación catalizadas por la DNA polimerasa propia de la célula
donde se realiza el proceso,célula anfitriona.
•  Para ello el fragmento de DNA o cDNA, inserto, se une a otro
DNA, vector de clonación.
•  Un DNA recombinante se incorpora a la célula anfitriona donde se
produce lareplicación.

Recordar:
Aislamiento del DNA a clonar

Preparación del vector de clonación,
Plásmido, cósmido, virus, etc
Unión del DNA al vector
Formación de DNA recombinante

Introducción delDNA recombinante,
en bacterias, empleando diversos métodos.
Célula competente

Propagación y selección celular

Competencia Celular
•  Estado fisiológico característico, que permite captar ADNdel medio exterior.
•  Este estado es diferente para cada especie bacteriana.
•  Existen algunos factores que afectan esta característica
como: densidad, temperatura, pH, nutrientes.Incorporación de rDNA en Células Anfitrionas
Cel. Procariontes (Células de Bacterias ):

 
Con frecuencia las células anfitrionas son procarióticas, principalmente
E. Coli, por ser de fácilobtención, manipulación, multiplicación y de
genética conocida.
• Transformación : La célula capta moléculas de ADN que se encuentran
en el medio externo, las introduce en su interior y las incorpora a sugenoma mediante recombinación.
•  Cotransformación: Integración al vector mas de un tipo de DNA (dos
genes, un gen y un regulador, etc.).
•  Transducción : introducir ADN en la célula hospedadorautilizando
como vector de clonación el genoma de un virus bacteriófago.

Incorporación de rDNA en Células Anfitrionas
Cel. Eucariontes (Células de Levaduras y Células Animales):
Las células...