Centrifugaci N

Centrifugación
Método de separación

Definicion


La centrifugación es un método por el
cual se pueden separar sólidos de líquidos
de diferente densidad mediante una fuerza
rotativa, de una máquinallamada
centrífuga, la cual imprime a la mezcla con
una fuerza mayor que la de la gravedad,
provocando la sedimentación de los sólidos
o de las partículas de mayor densidad.

Fundamento teórico
El objetivo de la centrifugación es separar
sólidos insolubles (de partículas muy
pequeñas difíciles de sedimentar) de un
líquido. Para ello, se aplica un fuerte campo
centrífugo, con lo cual laspartículas
tenderán a desplazarse a través del medio
en el que se encuentren con la aceleración
G. E = velocidad angular2 x radio.

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Centrifugacióndiferencial:


Se basa en la diferencia en la densidad de las
moléculas. Esta diferencia debe ser grande
para que sea observada al centrifugar. Las
partículas que posean densidades similares
sedimentaránjuntas. Este método es
inespecífico, por lo que se usa como
centrifugación preparativa para separar
componentes en la mezcla (por ejemplo, para
separar mitocondrias de núcleos y membrana)
pero no es útilpara separar moléculas.

Ultracentrifugación:


Permite estudiar las características de
sedimentación de estructuras subcelulares (
lisosomas, ribosomas y micro somas) y
biomoléculas. Utiliza rotores(fijos o de
columpio) y sistemas de monitoreo. Existen
diferentes maneras de monitorear la
sedimentación de las partículas en la ultra
centrifugación, el más común de ellos
mediante luz ultravioleta ointerferones.

centrifugación isopícnica:


Partículas con el mismo coeficiente de
sedimentación se separan al usar medios
de diferente densidad. Se usa para la
separación de ADN con muchafrecuencia.

Centrifugación zonal:


Las partículas se separan por la diferencia en
la velocidad de sedimentación a causa de la
diferencia de masa de cada una. La muestra
se coloca encima de un gradiente...