Chagas Y Direcrto

Prueba De Coombs Directa

Objetivo.

Demostrar la presencia de anticuerpos hemoagrupadores absorbidos a los hematies en vivo para evitar enfermedades postransfusionales inmediatas.

Fundamento.

Se basa en el principio de los ateroanticuerpos contra componentes del suero humano según la descrita  por Mareschi y los principios de la aglutinación publicados por Landsteiner. Los eritrocitoshumanos en presencia de un anticuerpos dirigido contra un antígeno que posean, pueden ser sensibilizadas para no lograr la aglutinación por la naturaleza misma del anticuerpo o el antígeno en cuestión. El suero antihumano, reaccionará contra la gamma globulina que han sensibilizado a componentes del complemente humano y propiciará la aglutinación de los eritrocitos.


Introducción.

Marechi en 1908escribió el principio de la reacción de antiglobulina. Fue hasta 1945, cuando se usó como prueba inmonohematológica por Coombs, Maurant y Race detectan anticuerpos anti Rh. En 1957 Dacie y colaboradores definieron la reacción del suero de antiglobulina con componentes de complemento humano. El suero anti-humano, llamado suero de Coombs se prepara por medio de inyecciones repetidas a los animalescon sueros humanos mezclados del grupo 0, después de eliminar hemolisinas y aglutinas no específicas se agrega al suero ácido de sodio al 0.1% como conservador. El suero deberá mantenerse entre 2° y 8°C mientras no esté en uso, para evitar su desnaturalización y contaminación. Como lo dice su nombre, esta prueba permite establecer la presencia de globulinas; pero puesto que los anticuerpos songlobulinas, permite encontrarlas también. Los anticuerpos incompletos, entre ellos muchos de los que explican la eritroblastosis fetal y la anemia hemolítica adquirida, se absorben sobre la superficie de los eritrocitos, pero no los aglutinan. El suero antiglobulina humana (de Coombs) permite reconocer estos glóbulos rojos sensibilizados al combinarse con los anticuerpos globulinicos que yacubren su superficie, con lo cual se produce la aglutinación. Puesto que el suero contiene globulinas que neutralizan muy rápidamente los anticuerpos antigobulinas humanas (de Coombs), es evidente que para identificar los glóbulos sensibilizados es absolutamente necesario remover la totalidad del suero de los glóbulos mediante lavados repetidos (tres cuando menos)  con grandes volúmenes (50 a 100veces el volumen de los glóbulos rojos) de suero fisiológico estéril.
El suero de Coombs, es un auxiliar en el diagnóstico por lo que que se usa rutinariamente en las siguientes pruebas:
1.      Prueba de compatibilidad o pruebas cruzadas.
2.      Detección e identificación de anticuerpos.
3.      Prueba para la variante del antígeno Rh-D llamada Du.4.      Pruebas de eritrocitos en cordón umblical a pacientes transfundidos
Material

Gradilla metálica
Tubos de vidrio(13 x 75mm).
Pipeta Pasteur con bulbo
Cronómetro
Torundas con alcohol
Jeringa desechable Centrífuga
PRUEBA DE COOMBS DIRECTA: La prueba directa de Coombs se usa parademostrar la presencia de los anticuerpos que han fijado en las células del paciente in vivo, por ejemplo en la enfermedad hemolítica del recién nacido, en la anemia hemolítica adquirida, etc.

Procedimiento
1.      Preparar una suspensión al 2% en solución salina normal de las células probadas.2.      Agregue dos gotas de la suspensión de las células preparadas a un tubo de 13 x 75mm.
3.      Lavar con solución salina y centrifugue a 3500 r.p.m. durante 1 minuto. Efectúe este lavado tres veces. 4.      Después del último lavado, decante lo más posible....