Ciclo De Krebs
Páginas: 27 (6571 palabras)
Publicado: 9 de enero de 2013
CARPETA
DE
TRABAJOS PRÁCTICOS
DE
QUÍMICA BIOLÓGICA II
Profesor: Dr. Osvaldo León Córdoba
J.T.P: Bioq. María Andrea Abalos
Aux. 1ra: Bioq. Mónica Beatriz Becerra
REGLAMENTO DE QUIMICA BIOLOGICA II 2010
1- Puntualidad en el horario de los trabajos Prácticos
2- Aprobación del 85% de los Trabajos Prácticos (asistencia, aprobación cuestionario y del
informe).
3-El parcialito se tomaraantes de cada TP; los desaprobados podrán recuperarse antes de cada
parcial.
4- Se tomaran 3 exámenes parciales que incluirán cada uno 5 unidades del programa de la
asignatura.
5- Cada unidad se aprueba con el 60%, pudiendo recuperarse hasta dos unidades
6- Al final de la cursada se podrá rendir un recuperatorio final.
7- Como trabajo final los alumnos deberán exponer en un seminario, untrabajo de
investigación, entregado por la cátedra.
CRONOGRAMA QUIMICA BIOLOGICA II
2010
TEORIAS Miércoles 11-14 hs Aula: 101 y Jueves 10-13 hs Aula: 103
TRABAJOS PRACTICOS MARTES 9,30-13 h Laboratorio A
Martes
3/8
Presentación – Teoría
Martes
10/8
Teoría
Martes
17/8
Teoría
Martes
24/8
Teoría
Martes
31/8
I PARCIAL
Martes
7/9
TP 1.Proteínas I
Martes
14/9
SEMANA DEL ESTUDIANTE
Jueves
16 /9
RECUPERATORIO I PARCIAL
Martes
21/9
TP 2. Proteínas II
Martes
28/9
TP 3. Proteínas III
Martes
5/10
TP 4. Proteínas IV
Martes
12/10
TP 5. Inducción
Martes
19/10
TP 6. Glucógeno: cuantificación en tejidos
Martes
26/10
TP 7. Producción de Piruvato y Acetaldehído durante lafermentación de
Glucosa.
Viernes
29/10
II PARCIAL
Martes
02/11
TP 8. Fotosíntesis
Viernes
12/11
RECUPERATORIO II PARCIAL
Martes
16/11
III PARCIAL
Jueves
18/11
SEMINARIO
Jueves
25/11
RECUPERATORIO III PARCIAL
Lunes
29/11
RECUPERATORIO FINAL
Química Biológica II
2010
TRABAJO PRÁCTICO 1
PROTEINAS I
PURIFICACION DE UNA ENZIMA: LALISOZIMA DE HUEVO
OBJETIVO:
Purificar la enzima lisozima a partir de la clara de huevo por cromatografía de intercambio
iónico. Purificación mediante electroforésis en geles de poliacrilamida
Determinación de la actividad enzimática por espectrofotometría.
INTRODUCCION:
El nombre de lisozima o muramidasa (EC 3.2.1.17) incluye a un grupo de enzimas que catalizan la
hidrólisis de enlacesglicosídicos β(1→ 4) de los polisacáridos de la pared celular bacteriana. Son
proteínas globulares constituidas por una sola cadena polipeptídica (129 aminoácidos para la
lisozima de Gallus gallus) y de peso molecular comprendido en el rango de 14 a 30 KDa. Estas
proteínas contienen cuatro puentes cruzados disulfuro que contribuyen a su elevada estabilidad.
La lisozima fue la primera proteínasecuenciada, la primera enzima de la que se dispuso de un
modelo tridimensional (usando cristalografía de rayos x) y la primera para la que se propuso un
mecanismo de acción detallado.
1)
CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO
La cromatografía de intercambio iónico se fundamenta en las propiedades ácido-base de las
proteínas. Una proteína, a pH menor de su pI (punto isoeléctrico), tendrácarga positiva y a pH
mayor de su pI presentará carga negativa. Por lo que, en el primer caso, se unirá a una resina con
carga negativa (Carboximetil-celulosa, CM-celulosa) y en el segundo a una resina con carga
positiva (Dietilaminoetil-celulosa, DEAE-celulosa).
4
Química Biológica II
2010
Una vez unida la proteína a las resinas, estas se pueden eluir de dos formas distintas:
1)variando el pH del medio hasta alcanzar el pI
2) mediante un gradiente iónico añadiendo el contraión correspondiente (Na+ en el caso de
intercambio catiónico o Cl- para el intercambio aniónico)
Dado que el pI de la LISOZIMA es de 11, dos unidades de pH superior al del resto de las proteínas
de la clara del huevo, a un pH de 9,5 - 10 la lisozima es prácticamente la única proteína con
carga...
DE
TRABAJOS PRÁCTICOS
DE
QUÍMICA BIOLÓGICA II
Profesor: Dr. Osvaldo León Córdoba
J.T.P: Bioq. María Andrea Abalos
Aux. 1ra: Bioq. Mónica Beatriz Becerra
REGLAMENTO DE QUIMICA BIOLOGICA II 2010
1- Puntualidad en el horario de los trabajos Prácticos
2- Aprobación del 85% de los Trabajos Prácticos (asistencia, aprobación cuestionario y del
informe).
3-El parcialito se tomaraantes de cada TP; los desaprobados podrán recuperarse antes de cada
parcial.
4- Se tomaran 3 exámenes parciales que incluirán cada uno 5 unidades del programa de la
asignatura.
5- Cada unidad se aprueba con el 60%, pudiendo recuperarse hasta dos unidades
6- Al final de la cursada se podrá rendir un recuperatorio final.
7- Como trabajo final los alumnos deberán exponer en un seminario, untrabajo de
investigación, entregado por la cátedra.
CRONOGRAMA QUIMICA BIOLOGICA II
2010
TEORIAS Miércoles 11-14 hs Aula: 101 y Jueves 10-13 hs Aula: 103
TRABAJOS PRACTICOS MARTES 9,30-13 h Laboratorio A
Martes
3/8
Presentación – Teoría
Martes
10/8
Teoría
Martes
17/8
Teoría
Martes
24/8
Teoría
Martes
31/8
I PARCIAL
Martes
7/9
TP 1.Proteínas I
Martes
14/9
SEMANA DEL ESTUDIANTE
Jueves
16 /9
RECUPERATORIO I PARCIAL
Martes
21/9
TP 2. Proteínas II
Martes
28/9
TP 3. Proteínas III
Martes
5/10
TP 4. Proteínas IV
Martes
12/10
TP 5. Inducción
Martes
19/10
TP 6. Glucógeno: cuantificación en tejidos
Martes
26/10
TP 7. Producción de Piruvato y Acetaldehído durante lafermentación de
Glucosa.
Viernes
29/10
II PARCIAL
Martes
02/11
TP 8. Fotosíntesis
Viernes
12/11
RECUPERATORIO II PARCIAL
Martes
16/11
III PARCIAL
Jueves
18/11
SEMINARIO
Jueves
25/11
RECUPERATORIO III PARCIAL
Lunes
29/11
RECUPERATORIO FINAL
Química Biológica II
2010
TRABAJO PRÁCTICO 1
PROTEINAS I
PURIFICACION DE UNA ENZIMA: LALISOZIMA DE HUEVO
OBJETIVO:
Purificar la enzima lisozima a partir de la clara de huevo por cromatografía de intercambio
iónico. Purificación mediante electroforésis en geles de poliacrilamida
Determinación de la actividad enzimática por espectrofotometría.
INTRODUCCION:
El nombre de lisozima o muramidasa (EC 3.2.1.17) incluye a un grupo de enzimas que catalizan la
hidrólisis de enlacesglicosídicos β(1→ 4) de los polisacáridos de la pared celular bacteriana. Son
proteínas globulares constituidas por una sola cadena polipeptídica (129 aminoácidos para la
lisozima de Gallus gallus) y de peso molecular comprendido en el rango de 14 a 30 KDa. Estas
proteínas contienen cuatro puentes cruzados disulfuro que contribuyen a su elevada estabilidad.
La lisozima fue la primera proteínasecuenciada, la primera enzima de la que se dispuso de un
modelo tridimensional (usando cristalografía de rayos x) y la primera para la que se propuso un
mecanismo de acción detallado.
1)
CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO
La cromatografía de intercambio iónico se fundamenta en las propiedades ácido-base de las
proteínas. Una proteína, a pH menor de su pI (punto isoeléctrico), tendrácarga positiva y a pH
mayor de su pI presentará carga negativa. Por lo que, en el primer caso, se unirá a una resina con
carga negativa (Carboximetil-celulosa, CM-celulosa) y en el segundo a una resina con carga
positiva (Dietilaminoetil-celulosa, DEAE-celulosa).
4
Química Biológica II
2010
Una vez unida la proteína a las resinas, estas se pueden eluir de dos formas distintas:
1)variando el pH del medio hasta alcanzar el pI
2) mediante un gradiente iónico añadiendo el contraión correspondiente (Na+ en el caso de
intercambio catiónico o Cl- para el intercambio aniónico)
Dado que el pI de la LISOZIMA es de 11, dos unidades de pH superior al del resto de las proteínas
de la clara del huevo, a un pH de 9,5 - 10 la lisozima es prácticamente la única proteína con
carga...
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