Ciclo nitrigeno

MICROORGANISMOS FIJADORES DE NITRÓGENO
Hernández P*, Hernández E*.
* Estudiantes de Microbiología Industrial de la Pontificia Universidad Javeriana.
hernandez-paola@javeriana.edu.co; eliana.hernandez@javeriana.edu.co

RESULTADOS
Con el fin de aislar microorganismos no asociativos fijadores de nitrógeno atmosférico, se realizó una metodología para el aislamiento de Azotobacter sp. en agarAshby (Figura 1 ). Los resultados obtenidos se registraron en la tabla 1, en la cual se muestra (i) el porcentaje de gránulos positivos, los cuales son aquellos que presentan exopolisácarido; (ii) el numero de gránulos que presentan pigmentación; y (iii) el informe de la coloración de Gram realizada. La producción de exopolisácarido presentada en los gránulos y la pigmentación café se puede observaren las figura 2.
Tabla 1. Porcentaje de gránulos sospechosos para bacterias fijadoras de nitrógeno no simbióticas
Número de gránulos positivos | Número de gránulos con pigmentación | Coloración de Gram |
52,0 % | 11 | Bacilos Gram negativos sin formación de quistes Coloración roja de fondo (exopolisácarido).
|

Figura 1. Gránulos de suelo en agar Ashby.

Figura 2. Gránulos de sueloen agar Ashby después de la incubación a 30°C durante 2 semanas.

Al realizar la coloración de Gram a partir del exopolisácarido, bacilos Gram negativos; lo cual se puede evidenciar en las figura 3, las cuales corresponden a la microscopia óptica de la coloración mencionada anteriormente.

B
E

Figura 3. Microscopia óptica a partir del exopolisácarido producido. E es el exopolisácarido y Bbacterias.


Con el fin de asilar microorganismos asociativos simbióticos fijadores de nitrógeno atmosférico, se realizó una metodología para el asilamiento de Rhizobium sp. Los resultados obtenidos se registraron en la tabla 2, en la cual se consignaron datos de las características macroscópicas y microscópicas del nódulo obtenido de la leguminosa y delas colonias aisladas en agar YMA. En la figura 6 y 7 se pueden observan las características microscópicas y en la figura 5 las características macroscópicas del microorganismo en agar YMA.
Tabla 2. Características macroscópicas y microscópicas de Rhizobium sp.
Nódulo | Agar YMA |
Características macroscópicas | Características microscópicas | Características macroscópicas | Característicasmicroscópicas |
Color rojo pálido | Bacteroides delgados en forma de Y | Colonias rosadas pálidas, cremosas y con presencia de mucosidad. | Bacilos Gram negativos |

Figura 5. Siembra por agotamiento en agar YMA a partir de los nódulos.
Figura 6. Microscopia óptica a partir del nódulo.


Figura 7. Microscopia óptica a partir de una colonia aislada en agarYMA.

Por último, con el objetivo de aislar microorganismos asociativos a rizósfera, se realizo una metodología para el aislamiento de Azospirillum. Los resultados obtenidos se registraron en la tabla 3, en la cual se consignaron las características iniciales y finales de los medios semisólidos y el crecimiento difuso en la parte media de los mismos.
Tabla 3. Cambios en los medios semisólidoNFB y JMB
Medio semisólido NFB | Medio semisólido JMB |
Características iniciales | Características finales | Crecimiento difuso en la parte media | Características iniciales | Características finales | Crecimiento difuso en la parte media |
Color: Azul agua Marina | Color: azul agua marina no se observó viraje | Ausente | Color: Amarillo | Color: Amarillo | Presente |La biomasa formada en los medios semisólidos fue sembrada por agotamiento en los medios sólidos respectivos y los resultados obtenidos fueron registrados en la tabla 4, en donde se pretendía informar las características microscópicas y macroscópicas de las colonias aisladas. La figura 8...