Ciencia

EAP TECNOLOGIA MÉDICA
AREA: LABORATORIO CLINICO
CURSO: ANALISIS INSTRUMENTAL

PRACTICA Nº 11 - A

FOTOCOLORIMETRÍA

COMPETENCIAS:

Al finalizar la práctica, el alumno será capaz de:

1.- Construye e interpreta una curva de calibración
2.- Determina la longitud de onda de máxima absorbancia para soluciones coloreadas.
3.- Reconoce los 2 métodos para la determinación de laconcentración de una solución
coloreada.
4.- Determina la concentración de una muestra problema haciendo uso de los dos métodos.

A= Absorbancia = DO A = 2 – Log % T A = ε.l.c A = Unidades KLET/500

[MP]= StAbSt*AbMP*Fd [MP]=mgstAbst*Abmp*100VR*VfmpVfst

PARTE EXPERIMENTAL

1.- Preparar la siguiente batería de tubos.Solución stock: Permanganato de potasio (KMnO4) 8 mg%.

Tubos Nº | 1 | 2 | 3 | 4 | MP | MP’ | MP’’ |
ml KMnO4 | 0,5 | 1 | 2 | 4 | - | - | - |
MP diluida | - | - | - | - | 2 | 1 | 3 |
ml Agua destilada | Csp 5 ml | 3 | 1.5 | 4.5 |
Concentración mg% | | | | | |
Abs 410 nm | | | | | |
Abs 527 nm | | | | | | | |
Abs 620 | | | | | |
Fc[ ] | | | | | |Fc promedio | | |

Leer las absorbancias de los 4 tubos a las siguientes longitudes de onda (λ): 410 nm,
527 nm y 620 nm en el espectrofotómetro.
2. Con los datos obtenidos: Construir en un papel milimetrado las gráficas de
absorbancias versus concentración de KMnO4 en las 3 longitudes de onda.
3. Con las gráficas elegir la longitud de onda óptimapara el KMnO4
4. La gráfica para el λ optimo representa la curva de calibración. medir la absorbancia de
la muestra problema haciendo la dilución apropiada para la muestra.
5. Obtener el Factor de calibración (Fc) promedio de las soluciones estándares de la curva
de calibración.
6. Diluir la MP (A ó B) apropiadamente, hasta que la intensidad de color este en el rangode color de la
batería de tubos de la curva de calibración.
Determine la dilución (d) de la muestra.
Hallar el Fd de la muestra Fd = d-1
Leer las Muestras (MP, MP’, MP’’)
7. Calcular la concentración de la muestra problema (MP) por los métodos:
a) Gráficamente, interpolando la absorbancia en la curva de calibración.
b)Analíticamente, multiplicando la absorbancia por el Fc promedio y el factor de dilución.
8. Comparar ambas medidas y analizar los resultados.
9.- Calcular la concentración de las MP’ y MP’’, por el método analítico

CUESTIONARIO

1. Porqué es importante determinar la longitud optima de lectura para las soluciones coloreadas

2. Determine las absorbancias conociendo los % T:

a) % 5b) %10 c) % 20 d) % 4 . Comente sus resultados

Determine el % T Dada las Absorbancias

e) 0.05 f) 0.10 g) 0.20 h) 0.40 Comente sus resultados

3. Que factores alteran la Ley de Lambert y Beer.

4. Explique la necesidad de diluir una muestra.

5. Una muestra de KMnO4 que se ha diluido sucesivamente: al medio, tercio y al décimo. Lalectura de la muestra diluida es 0.125. Determinar la concentración de la muestra haciendo uso de ambos métodos realizados en la práctica.

6. Un St de 5 mg% absorbe como 0.250 en una cubeta de 2 cm, hallar la concentración de una muestra que diluido al quinto presenta una lectura de 0.125 en una cubeta de 1 cm

EAP TECNOLOGÍA MÉDICA

AREA LABORATORIO CLINICO
CURSO ANALISISINSTRUMENTAL

PRACTICA 11 - B

EJERCICOS: DETERMINACION DE LA CONCENTRACION
DE MUESTRAS PROBLEMAS

1. Determinar la concentración de las muestras haciendo uso del método gráfico y analítico
Para las soluciones de permanganato que se indican a continuación:

MUESTRA DILUCIÓN ABSORBANCIA
A 1 0,2
B ¼ 0,160
C ½ y 1/10 0,080
D 1/10 y 1/5...