Ciencia

Estructura de aminoácidos y precipitación de caseína

Leidy Daniela Escobar Narváez 213022
Carolina Gutiérrez Jordán 213030
Paola Andrea Micolta 212547
Departamento de Ciencia Animal, Facultad de Ciencias Agropecuarias.
Programa de Zootecnia.

Mayo 22 de 2014
Objetivo de la practica
Discutir las características estructurales de los aminoácidos, elconcepto de PH o punto isoeléctrico, mediante la precipitación de la caseína.
Alcance
El estudiante al finalizar la practica estará en la capacidad de manejar el concepto de punto isoeléctrico de una proteína y su relación con el pH del medio en el que se encuentra.

Introducción
Los aminoácidos de caracterizan por contener un grupo amino, un grupo carboxilo, un átomo de hidrogeno y un radical R,que los diferencia entre sí. En condiciones fisiológicos, los grupos aminos se hallan protonados (-Nh3+) y los grupos ácidos, como bases conjugadas (COO-). Las proteínas, por su parte, son polímeros de aminoácidos que se enlazan mediante la interacción entre el grupo carboxilo de un aminoácido y el grupo amino de otro.
Aunque las proteínas se encuentran como mezclas complejas, es posible separarunas de otras al variar el pH de la solución. Cuando alguna de ellas alcanza el denominado pH isoeléctrico, es decir, cuando su carga neta es cero, precipita y puede separarse. En la leche coexisten diversas proteínas, entre ellas, la caseína, una fosfoproteína cuyo pH isoeléctrico es alrededor de 4.7, por lo que al disminuir el pH hasta ese valor, ella precipita. Las demás proteínas permanecen enel líquido sobrenadante.





Materiales y métodos
Materiales
-Vaso de precipitados
-Leche
-Acido acético
Etanol
-Éter etílico
Toallas de papel

Método
En un vaso de precipitados, caliente 50 ml de leche hasta una temperatura de 40˚C aproximadamente y proceda a la adición, gota a gota, con agitación y calentamiento constantes, de acido acético 2 M, hasta cuando el pH sea 4.7.Enfrié la suspensión a temperatura ambiente, déjela reposar y filtre.
Lave el precipitado con 20 ml de una mezcla 1:1 de etanol y éter etílico y luego séquelo con toallas de papel. El precipitado corresponde a la proteína caseína.
1) Precipitación de proteína caseína
PI= 4.7
2) Verificación de presencia de proteína3) Determinación de presencia de carbohidratos.



Resultados

En la siguiente tabla se puede observar como el pH disminuye, de acuerdo a la cantidad de gotas de ácido acético que se añadían

Cantidad de gotas agregadas de ácido acético
PH resultante
0
6.42
10
6.34
10
5.88
10
5.21
7
4.80
1
4.72

El peso de la caseína después de secarla fue de 4.49
Luegorealizamos otro experimento para ver la presencia de proteínas. Utilizamos dos tubos de ensayos, en uno agregamos una mínima cantidad de caseína y para diluirla se le añadió 3 ml de agua destilada, procedimos a agitar muy bien, en el otro tubo de ensayo añadimos solamente suero, a cada tubo de ensayo le añadimos 1 mL de reactivo de biuret esperamos un tiempo y analizamos el cambio de color que hubo,en el que contenía caseína tomo un color violeta.
Despues Añadimos fehling A y fehling B mezclamos y agregamos un poco de suero procedimos a calentar por unos 5 minutos y nos dio como resultado un color naranja fuerte que nos indica presencia de carbohidratos
Al Analizar la presencia de riboflavina mediante luz uv, esta toma un color fluorescente.


Respuestas a las preguntas
1. ¿Cómopueden clasificarse los aminoácidos? Examine las características comunes de cada grupo, compare los diferentes radicales de cada aminoácido y familiarícese con su estructura.
Existen muchas formas de clasificar los aminoácidos; las dos que se presentan a continuación son las más comunes.
Según las propiedades de su cadena
Los aminoácidos se clasifican habitualmente según las propiedades de su...