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¿Qué es la cromatografía? ¿Qué métodos existen para usar solventes durante la cromatografía HPLC?
Tema: Selección y uso de Solventes en cromatografía HPLC
Fecha:30-Ago-2006Fuente:QuimiNet Sectores relacionados:Farmacéutica, Material y Equipo de Laboratorio
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Foto por: © Getty Images
Cromatógrafo
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La cromatografía es un método físico de separación basado en la distribución de los componentes de una mezcla entre dos fases inmiscibles, una fija o estacionaria yotra móvil. En cromatografía líquida, la fase móvil es un líquido que fluye a través de una columna que contiene a la fase fija.
La fase móvil puede ser un solvente puro o una mezcla de solventes.Cuando se trata de una mezcla, puede programarse la bomba para que tome solventes de diferentes botellas en una proporción determinada y realice la mezcla en una cámara de mezclado.
Dependiendo de laforma en que se usa el solvente tenemos dos métodos:
Método Isocrático: Cuando, durante toda la separación, se utiliza siempre el mismo solvente, se denomina isocrática, sin embargo es normalrealizar un gradiente de composición del solvente a lo largo de la cromatografía para mejorar la eficiencia y acortar la duración del proceso. Estos gradientes de solvente también son realizados en formaautomática por las bombas.
Método de Gradiente de Elución: Es un término que se utiliza para describir el proceso mendiante el cual se cambia la composición de la fase móvil. Pueden efectuarse dedos maneras:
A baja presión
A alta presión
Cuando se desarrolla un análisis usando el método de gradiente se debe tener presente dos objetivos:
Obtener la mejor resolución de los componentes dela muestra en el menor tiempo posible.
Asegurar alta precisión y exactitud.
Para obtener buenos resultados con el método de gradiente debemos seguir cinco pasos fundamentales:
Determinar la...
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