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PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA ENTEROBACTERIAS Susana González Gurrola 3°B CATEDRÁTICO: M.C. JHOADAN B. ROCÍO LUJÁN LÓPEZ
IDENTIFICACIÓN MICROBIANA Se entiende por identificación microbiana al conjunto de técnicas y procedimientos que se aplican para establecer la identidad de un microorganismo.
MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN BACTERIANA Los métodos más utilizados para la identificación microbiana, lospodemos clasificar en: 1. Métodos basados en criterios morfológicos 2. Métodos basados en tinción diferencial 3. Métodos basados en pruebas bioquímicas 4. Métodos basados en tipificación con fagos 5. Métodos basados en pruebas serológicas 6. Métodos basados en detección molecular View slide
En la mayoría de los casos la identificación no se realiza con base a un solo método, sino a lacombinación de más de uno. View slide
MÉTODOS BASADOS EN CRITERIOS MORFOLÓGICOS Los rasgos morfológicos han ayudado a los taxonomistas por muchos años a clasificar organismos. Los organismos superiores tienen rasgos anatómicos tan diferentes que pueden ser fácilmente utilizados en su clasificación, pero con respecto a los microorganismos, éstos lucen bajo el microscopio tan similares que se dificulta suclasificación.
Sin embargo, aun cuando la morfología celular dice poco sobre las relaciones filogenéticas, sigue siendo útil para la identificación bacteriana. Por ejemplo: la presencia de endosporas y su localización resulta de mucha utilidad en la identificación de bacilos esporulados.
MÉTODOS BASADOS EN TINCIÓN DIFERENCIAL La mayor parte de las bacterias, teñidas con Gram, las podemosclasificar como gram positivas o gram negativas, otras tinciones diferenciales, como la ácido resistente, se aplican a otro tipo de bacterias. Un examen microscópico de una lámina teñida por medio de gram o de una tinción diferencial es útil para obtener una información rápida sobre la calidad de un ambiente clínico.
MÉTODOS BASADOS EN TIPIFICACIÓN CON FAGOS La interacción entre un virus bacteriofago(fago) y su célula bacteriana sensible es sumamente específica, ya que el proceso de adsorción se encuentra mediado por receptores específicos tanto en el virus como en la célula bacteriana.
El uso de fagos específicos permite identificar y subclasificar bacterias dentro de una misma especie.
MÉTODOS BASADOS EN ENSAYOS SEROLÓGICOS Los métodos serológicos, implican la utilización depreparaciones de inmunoglobulinas específicas provenientes del suero o de un reactivo, y que pueden ser de gran utilidad en la identificación microbiana en muestras puras o en muestras biológicas.
MÉTODOS BASADOS EN BIOLOGÍA MOLECULAR Modernamente adquiere más importancia el uso de métodos basados en biología molecular donde, a través de procedimientos y reactivos, se pueden detectar determinadas secuenciasde ADN que son propias de un determinado agente microbiano.
MÉTODOS BASADOS EN PRUEBAS BIOQUÍMICAS Las pruebas bioquímicas han sido ampliamente utilizadas para diferenciar bacterias. Estas pruebas se fundamentan en demostrar si el microorganismo es capaz de fermentar azúcares, la presencia de enzimas, la degradación de compuestos, la producción de compuestos coloreados, etc.
Aun bacteriasfuertemente relacionadas pueden separarse en dos especies diferentes con base a pruebas bioquímicas. Por ejemplo, las bacterias entéricas gram negativas, forman un grupo muy grande y heterogéneo cuyo hábitat natural es el tracto gastrointestinal de humanos y otros animales. Esta familia, Enterobacteriaceae, incluye a varios patógenos que causan síndromes diarreicos.
Existen flujogramas, para laidentificación bacteriana, mediante pruebas bioquímicas de microorganismos. Por ejemplo, la presencia de un coco bacilo gram negativo, facultativo, fermentador de glucosa, oxidasa negativo, nos indica la presencia de una enterobacteria, para determinar su género podemos seguir el siguiente esquema.
PRUEBAS BIOQUÍMICAS • Citrato • Ureasa • Voges-Proskauer • Rojo de metilo • Sulfuro Indol...