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BIOLOGÍA II

Práctica 5
Fisiología de la digestión


Procesos de digestión

Los nutrientes que se consumen se procesan en el sistema digestivo por medio de mecanismos químicos y mecánicos. Los alimentos se disgregan y degradan para obtener productos que puedan absorberse a través del intestino. Los procesos químicos que se realizan incluyen la actuación de enzimas específicas de cadatipo de macromolécula.

Esta práctica se corresponde con el ejercicio 8 del libro PhysioEx (página 74), en concreto con las actividades 1, 3 y 4. En esta parte del libro encontrará las instrucciones necesarias para realizar los experimentos con el programa PhysioEx. El objetivo de esta práctica es:

1. Probar los efectos de la amilasa sobre el almidón, determinar el pH óptimo y analizar el efectode la temperatura obre la actividad enzimática.

2. Evaluar los efectos de la pepsina sobre BAPNA, una proteína sintética.

3. Evaluar la actividad lipasa.

► Amilasa

Empleando el programa PhysioEx, evaluar la actividad amilasa sobre el almidón siguiendo el siguiente cuadro:

|Tubo |Amilasa |Agua |pH 7.0 |pH 9.0 |pH 2.0 |Almidón |
|1 |■ |■ |■ | | | |
|2 | |■ |■ | | |■ |
|3 |■ | | |■| |■ |
|4 |■ | | | |■ |■ |


Incubar a 37 ºC durante 60 minutos.

Responda las siguientes cuestiones en referencia a los experimentos realizados

1. De acuerdo con los datos obtenidos, ¿qué efecto tiene el pH sobre la actividad amilasa? ¿qué interés tiene esto a nivel fisiológico? Aunque el pH óptimo de la Amilasa está entorno a 7, ésta actúa también a pH extremos, ácidos o básicos, lasaliva es de un pH simila

Actividad enzimática de la αamilasa
 Enviado por Agustín Garrido


Partes: 1, 2
1. Introducción
2.
3. Resultados
4. Discusión
Introducción:
La a-amilasa es una enzima proteica que se encuentra en la saliva humana y cataliza la degradación del almidón, que es un polisacárido de reserva vegetal. El almidón está formado por dos tipos de moléculas: la amilosa y laamilopectina, ambos polisacáridos de glucosa. La amilosa se conforma por cadenas lineales de glucosas unidas por enlaces a- C1-C4, mientras que la amilopectina tiene, además de estos últimos enlaces, uniones C1 con C6, formando cadenas ramificadas. La a-amilasa rompe uniones C1-C4, tanto en la amilasa como en la amilopectina, dejando dextrinas lineales y ramificadas (oligosacáridos)como productos. 
Para medir la actividad enzimática de la a-amilasa, se utilizará un test colorimétrico que detecta el almidón. Para ello se contará con una solución de iodo/ioduro de potasio (I2/IK), ya que el almidón en presencia de esta solución adquiere una coloración azulada característica. Esto tiene una explicación física: el iodo se coloca en el interior de la hélice que forma la amilosa (en lasregiones hidrofóbicas), formando un complejo de color azul. Cuando la a-amilasa actúa, degrada la amilosa, se desintegra la hélice y por tanto en presencia de I2/IK ya no dará una coloración azul.
Por lo tanto, en este TP mediremos la desaparición de sustrato (evidenciada por el test colorimétrico) para determinar la actividad de la enzima. Además, analizaremos cómo afectan las distintas condiciones enque actúa la enzima (pH, temperatura, concentración de NaCl), así como los efectos que pueden causar diferentes pretratamientos (proteinasa, calor).
La dilución óptima nos indicará cuánto debemos diluir la saliva para que se logre el efecto acromático dentro del rango propuesto (2-8 minutos).
Metodología:
Se partió de una muestra de saliva de un integrante del grupo y se la recogió en un vasode precipitado que se colocó en un recipiente con hielo para reducir la energía cinética (para disminuir el contacto de las moléculas, reduciendo las interacciones químicas que se pudieran producir) de compuestos presentes en la saliva que puedan afectar el funcionamiento de la proteína.
A partir de la muestra, se tomó una alícuota para impregnar un papel indicador de pH sobre un papel blanco....