Ciencis y Tecnologia de los Alimentos

Practica Nº 1: Determinación de Azucares Reductores
Método de Somogyi-Nelson
Introducción:
Los azucares que poseen un grupo reductor (carbono hemiacetal ohemicetal, o aldehído o cetona libre) pueden ser oxidados por agentes oxidantes relativamente suaves como los iones férrico (Fe+3) y cúprico (Cu2+). En estas reacciones el carbono carbonílico se oxida aácido carboxílico. Los azúcares que contiene estos grupos fácilmente oxidables se denominan azucares reductores, porque reducen al agente oxidante con que se trata. Los azucares que carecen de estosgrupos reductores son muy resistentes a la oxidación.
La determinación de azucares reductores se realizara siguiendo el método colorimétrico de Somogyi-Nelson. Este método permite ladeterminación cuantitativa de los azucares reductores liberados capaces de reducir Cu2+ hasta Cu+ en medio alcalino. El Cu+ en presencia de arsenomolibdato amónico forma un complejo estable de color azul, cuyaintensidad puede cuantificarse espectrofotométricamente.
Reactivos Utilizados:
Reactivo de Somogyi I
Reactivo de Somogyi II
Glucosa
Reactivo de Nelson
Materiales Utilizados:
12 Tubos de ensayo,de tapa roscada
Agitador Vórtex
Cubeta con agua hirviendo
Agua destilada
Pipetas automáticas
Espectrofotómetro
Cubetas de espectrofotometría
Gradilla
Procedimiento:
Para saberla cantidad de azucares reductores liberados, primero colocamos los 12 tubos de ensayo en la gradilla, 6 tubos serán estándar y los otros 6 para la tabla. Con ayuda de las pipetas automáticas, apartir de la muestra anterior, llenamos cada tubo de ensayo con 2 mL de la muestra problema y con 2 mL de reactivo de Somogyi.
Una vez llenos, tapamos los tubos, los agitamos en el vórtex y los incubamosen una cubeta con agua hirviendo durante 15 minutos. Una vez transcurridos los 15 minutos, los enfriamos con agua, y les añadimos 2 mL del reactivo Nelson y 4 mL de agua destilada. Por último, tras...