Cinética de crecimiento celular

Cinética de crecimiento celular

t Facultad de Ingeniería, Universidad de La Sabana, Km. 7 Autopista Norte de Bogotá, Chía, Cundinamarca, Colombia
Keywords: Concentración celular, absorbancia
Resumen
Abstract
Introducción
La cinética de crecimiento microbiano constituye una de las operaciones más utilizadas por la biotecnología, por lo tanto, es menester conocer los diferentes mecanismosde crecimiento, así como, la forma de cuantificación de los mismos. El crecimiento de  microorganismos puede mirarse bajo dos aspectos o tipos de crecimiento reproductivo, como élulas individuales o población de células en crecimiento sincronizado para estudio del ciclo de vida celular o división estadística de la población, o división al azar.
La división celular se efectúa luego de un aumentoen el tamaño de la célula, replicación del núcleo, división celular. De ésta manera una célula da nacimiento a dos células hijas de tamaño idéntico y conteniendo los mismos elementos estructurales y potencialidades. Por otro lado, algunas de las variables que pueden influir en el comportamiento de los microorganismos,como son la temperatura, la presión, el pH, la presencia de luz, suelen serconstantes o presentar variaciones mínimas poco significativas en un proceso determinado. Así, se suelen admitir sólo un reducido número de factores que pueden influir en el proceso y se les denomina factores limitantes; y entre ellos se destaca en numerosos procesos microbianos el sustratoCITATION Her03 \l 1034 (Hernandez Claudia, 2003).
Cuando una pequeña cantidad de células vivas se añade a unasolución de nutrientes y sustrato en condiciones óptimas de temperatura y pH, se produce este proceso de crecimiento celular. El proceso se puede describir en las siguientes etapas:
Inicialmente se produce un proceso de adaptación celular o fase de retraso, en el que no hay crecimiento.
Terminando este periodo se produce una aceleración hasta producirse un crecimiento exponencial  del número decélulas.
Al final de la fase exponencial se llega a una situación estacionaria de crecimiento nulo debido al agotamiento de  sustrato, o de algun componente necesario para el crecimiento
Finalizada esta etapa se produce la fase de muerte celular. Esta fase suele no ser interesante porque los procesos industriales se suelen diseñar los de las condiciones a las que esta fase tiene lugar.Metodología
Inicialmente se inocularon tres medios de cultivo (Glucosa, Galactosa y Lactosa) con 15 ml de solución que cotenía la bactería E. Coli, y un cuarto (Sacarosa y glucosa) con 15 ml de solución que contenia la bacteria Acidoláctica. Posteriormente se tomaron dos alícuotas de cada una de las muestras en el tiempo cero y se dispusierons en dos tubos ependorf para cada medio de cultivo con el fin derealizar un tratamiento posterior.
Los medios de cultivo se llevaron a incubar en un shaker a 37ºc y 250 rpm a las 9:30 am del 11 de septiembre de 2014. A las 11:30 am del mismo día se tomaron otras dos alícuotas de cada uno de los medios de cultivo, las cuales se almacenaron en dos tubos enpendorf para su posteior tratamiento. Este procedimiento se realizó a todos los medios de cultivo de nuevoa las 12:20 pm, 12:40pm, 1:00 pm, 1:20 pm y 1:40 pm.
Uno de los dos tubos ependorf obtenidos de cada muestra se llevó a centrifugar a 10000rpm durante dos minutos con el fin de eliminar las células suspendidas y poder realizar la prueba de determinación de azúcares reductors por medio de DNS y posteriormente determinar la g
0114300Tabla 1. Absorbancia obtenidaen cada muestra
0Tabla 1. Absorbancia obtenida en cada muestra

Glucosa Galactosa Lactosa Sacarosa + Glucosa
Hora Tiempo (minutos)   Muestra Abs [] Abs [] Abs [] Abs []
9:30 a.m. 0 Biomasa 0 0 0 0 0 0 0 0 0
DNS 0 0,299 28,6 1,176 21,05 0,874 15,77 0,669 12,19
11:50 a.m. 140 Biomasa 1 0,119 11,9 0,123 12,3 0,121 12,1 1,055 105,5
DNS 1 0,193 19,3 1,362 24,3 0,739 13,41 0,672 12,24
12:20...