Cin Tica Enzim Tica
Páginas: 3 (612 palabras)
Publicado: 28 de abril de 2015
Cinética enzimática:
Actividad enzimática
Cinética enzimática
Estudio de la velocidad de las
reacciones catalizadas por enzimas
Medición de la velocidad de reacción
La cantidad de enzima autilizar en una reacción se relaciona
con la velocidad de la misma, es decir con su actividad.
Es por lo tanto necesario medir la actividad (velocidad)
enzimática para poder utilizarla. En un experimentopara
medir la velocidad de reacción se requiere:
-Sustrato
-Amortiguador pH
-Enzima
-Baño temperatura
-Método de cuantificación del sustrato o producto
S
E
P
En un experimento al poner una enzimacon el
sustrato iniciará la generación de producto, al
incrementarse el tiempo, aumentará la cantidad
de producto. El comportamiento que se
observará será el siguiente:
Una gráfica de productomedido por unidad
de tiempo
[Producto]
S
P ó P ó E(inhibida o desnaturalizada)
S→P
S→P
S→P
S
[P]αtiempo
tiempo
Velocidad inicial
• Cuando SP, existen condiciones de velocidad
inicial, es decir:Intervalo de tiempo en el que la concentración de sustrato
varía menos del 5%
Las enzima está casi en condiciones originales, sin gasto
aparente
La velocidad inicial es equivalente a la velocidad de laenzima, a la actividad.
Ejemplo
Datos:
Tiempo (min)
5
10
15
20
25
30
Producto (mM)
1.8
3.7
6.3
8.2
9
9.2
Graficando datos
10
9
Producto (mM)
8
7
6
5
4
3
2
1
0
0
5
10
15
20
25
30
35Tiempo (min)
Últimos puntos no corresponden a velocidades iniciales, se eliminarán
Eliminando puntos y obteniendo ecuación
9
8
f(x) = 0.44x - 0.45
R² = 1
Producto (mM)
7
6
5
4
3
2
1
0
4
6
8
1012
14
16
18
20
22
Tiempo (min)
La pendiente es una razón de cambio de la concentración de producto respecto a tiempo
Sus unidades son mM/min, es decir una velocidad: cambio de concentraciónpor unidad de tiempo
La actividad se reporta como UI o U
• 1U = 1mol de producto sintetizado/min
• La actividad volumétrica U/ml
La velocidad calculada (pendiente gráfica) es:
0.436 mmol/L*min
Para...
Actividad enzimática
Cinética enzimática
Estudio de la velocidad de las
reacciones catalizadas por enzimas
Medición de la velocidad de reacción
La cantidad de enzima autilizar en una reacción se relaciona
con la velocidad de la misma, es decir con su actividad.
Es por lo tanto necesario medir la actividad (velocidad)
enzimática para poder utilizarla. En un experimentopara
medir la velocidad de reacción se requiere:
-Sustrato
-Amortiguador pH
-Enzima
-Baño temperatura
-Método de cuantificación del sustrato o producto
S
E
P
En un experimento al poner una enzimacon el
sustrato iniciará la generación de producto, al
incrementarse el tiempo, aumentará la cantidad
de producto. El comportamiento que se
observará será el siguiente:
Una gráfica de productomedido por unidad
de tiempo
[Producto]
S
P ó P ó E(inhibida o desnaturalizada)
S→P
S→P
S→P
S
[P]αtiempo
tiempo
Velocidad inicial
• Cuando SP, existen condiciones de velocidad
inicial, es decir:Intervalo de tiempo en el que la concentración de sustrato
varía menos del 5%
Las enzima está casi en condiciones originales, sin gasto
aparente
La velocidad inicial es equivalente a la velocidad de laenzima, a la actividad.
Ejemplo
Datos:
Tiempo (min)
5
10
15
20
25
30
Producto (mM)
1.8
3.7
6.3
8.2
9
9.2
Graficando datos
10
9
Producto (mM)
8
7
6
5
4
3
2
1
0
0
5
10
15
20
25
30
35Tiempo (min)
Últimos puntos no corresponden a velocidades iniciales, se eliminarán
Eliminando puntos y obteniendo ecuación
9
8
f(x) = 0.44x - 0.45
R² = 1
Producto (mM)
7
6
5
4
3
2
1
0
4
6
8
1012
14
16
18
20
22
Tiempo (min)
La pendiente es una razón de cambio de la concentración de producto respecto a tiempo
Sus unidades son mM/min, es decir una velocidad: cambio de concentraciónpor unidad de tiempo
La actividad se reporta como UI o U
• 1U = 1mol de producto sintetizado/min
• La actividad volumétrica U/ml
La velocidad calculada (pendiente gráfica) es:
0.436 mmol/L*min
Para...
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