Cinetica Quimca
Trabajo Práctico N°6: “CINETICA ENZIMATICA (correcciones)”
Alumnos
Sebastián Moyano (sebamoyano88@gmail.com)
Tomás Gobbi (tgobbi2@hotmail.com)
Sebastián Franzese(f_sebastian84@hotmail.com)
Formación de producto en función del tiempo
Se grafica Absorbancia a 555 nm en función del tiempo ya que, por la ley de Lambert-Beer, la absorbancia es directamenteproporcional a la concentración según la ecuación:
[PBG] (mg/ml)= (A555nm - B)/ ε . l
Donde [PBG] es la concentración del producto PBG en la muestra; A la absorbancia a 555nm; B el blanco; ε laabsortibidad molar del compuesto y l la longitud de la cubeta.
El ajuste lineal indica que aún a tiempos largos, más de una hora de incubación, la enzima trabaja a velocidad inicial, y hay unarelación directamente proporcional entre el producto formado y el tiempo de incubación.
Estudios de inhibición por ácido levulinico
Nota: el programa utilizado para graficar no permite laextraolación de la curva más allá de lo dibujado.
En la siguiente gráfica la recta obtenida del ajuste lineal tiene la forma Y = B . X + A donde se representa:
VM (1 + [I]) =Km . [I] + Km
Km Ki Ki .Vm VM
Donde Y representa la Pendiente (m) del gráfico.
El también llamado gráfico de Dixonpermite determinar Ki directamente del gráfico, ya que la ordenada al origen es igual al punto (-Ki ; 0)
De esta manera Ki 0 = 0,675 . X + 0,28X0 = - 0,414 -Ki = X0
Ki = 0,414 mM
De esta manera se obtiene un valor aproximado para Ki = 0,414 mM
Cuestionario
1) ¿ Por qué se realizan losensayos a tiempo 0?
2) ¿Cuál será el volumen final de estos tubos?
3) ¿Los tubos a tiempo cero se colocan en el baño a 37°C? Justifique su respuesta.
1) El tubo 1 no contiene sustrato y el volumen...
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