Cinética enzimática

CINÉTICA ENZIMÁTICA Las enzimas son agentes químicos que ayudan a que los procesos bioquímicos del organismo se lleven a cabo a una velocidad compatible con la vida. Las enzimas son catalizadores que funcionan aumentando la velocidad de las reacciones bioquímicas de 106 a 1012 veces en comparación con las reacciones no catalizadas. Las enzimas tienen ciertas propiedades: • • • No se alteran niconsumen durante la reacción Solo se requieren pequeñas cantidades de ellas Aceleran la velocidad a la cual la reacción química alcanza el equilibrio

Todas las enzimas son proteínas como tales tienen una secuencia exclusiva de aminoácidos y estructura tridimensional. Algunas enzimas son proteínas conjugadas y requieren de un cofactor: • • • Apoenzima: parte proteica de la enzima Cofactor: Partede naturaleza no proteica que forma parte de las proteínas conjugadas. Su naturaleza puede ser variada: iones metálicos (como las metoloenzimas) o moléculas orgánicas llamadas coenzimas. Coenzima: En sentido estricto, grupo activo disociable de una enzima que transferie grupos químicos. En sentido amplio, es cualquier componente catalíticamente activo de una enzima y se unen a la enzimacovalentemente a la enzima como grupo protético. Compuestos orgánicos con estructura relacionada con las vitaminas que actúan de forma semejante al cofactor. Holoenzima: unidad formada por el cofactor en la apoenzima

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1. FACTORES QUE INFLUYEN EN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA • • • Concentración de sustrato. La velocidad de una reacción enzimática aumenta conforme la concentración de sustrato se incrementaConcentración de la enzima. La velocidad de reacción aumenta cuando la concentración de la enzima es mayor y se reduce cuando la concentración enzimática es menor Temperatura. Las reacciones catalizadas por enzimas se aceleran cuando la temperatura aumenta, lo que se debe, en parte, al incremento de movimiento de las moléculas que provoca colisiones más frecuentes del sustrato con la enzima. Sinembargo, cuando se alcanza el valor óptimo, la velocidad de reacción se reduce, ya que el incremento de temperatura provoca la desnaturalización de la enzima y la pérdida de su actividad catalítica pH. La mayoría de las enzimas tienen un rango de pH restringido en el que su actividad es óptima Activadores. Las sustancias que se denominan activadores incrementan la velocidad de una reacciónenzimática. En general son moléculas o iones pequeños. Inhibidores. Ciertas sustancias actúan inhibiendo la actividad. Inhibidores competitivos: similares a la molécula sustito normal y compiten con ella para

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enlazarse con el sitio activo de la una enzima específica. Inhibición no competitiva: Se produce cuando una sustancia se enlaza con la enzima en un sitio distinto al sitio activo;este enlace provoca un cambio de configuración en la estructura alterando el sitio activo. Esta inhibición puede ser reversible o irreversible 2. MÉTODOS DE VELOCIDAD DE REACCIÓN + PUNTO FINAL. El más empleado anteriormente. Se toma un punto después de dejar incubar un periodo predeterminado. Otra opción es tomar la lectura inicial y la final + PUNTOS MÚTIPLES. Se toman varis lecturas deabsorbancia en el curso de la reacción, lo que permite verificar si ésta es lineal o no. Actualmente el más utilizado + VIGILANCIA CONTINUA. Se utiliza un espectrofotómetro con registrador para trazar el curso durante varios minutos. Se utiliza la pendiente de la curva para determinar la actividad enzimática 3. ENZIMAS COMO REACTIVOS Además de medir la actividad enzimática como un indicio de sus funcionesmetabólicas, las enzimas tienen otras funciones útiles en el laboratorio y se emplean como reactivos analíticos para determinar otros analitos. Como solo catalizan determinadas reacciones, su uso como reactivos da especificidad a otros procedimientos analíticos, ya que así se eliminan las interferencias de otras sustancias que comúnmente alteran los resultados de procedimientos no enzimáticos....