citometria
La citometria de flujo (CMF) es una técnica de análisis celular multiparametrico cuyo fundamento se basa en hacer pasar una suspensión de partículas (generalmente células) alineadas y de una en una por delante de un haz de láser focalizado. La citometría de flujo es una tecnología (proceso) que permite la medida simultánea de múltiples característicasfísicas de una sola célula. Estas medidas son realizadas mientras las células (partículas) pasan en fila, a una velocidad de 500 a 4000 células por segundo, a través del aparato de medida en una corriente defluido (1).
EL CITOMETRO NECESITA UN SISTEMA COMBINADO DE :
Fluidos, para introducir y restringir las células para análisis
Optica , una fuente de excitación y un sistema colección paragenerar y recoger las señales luminosas. El sistema de excitación consiste en un láser, lentes y prismas para dirigir el rayo. El sistema de colección consiste en espejos ópticos y filtros para encaminardeterminadas longitudes de onda hacia detectores ópticos determinados.
Electrónica, para convertir las señales ópticas en señales electrónicas proporcionales y digitalizarlas para análisiscomputacional.
SISTEMA HIDRAULICO: Controles neumático y fluidos para establecer un flujo laminar que permita a la suspensión celular atravesar la cámara de flujo.
SISTEMA OPTICO: Láser (Argón con luzmonocromática de 488nm , filtros , lentes y detectores.
SISTEMA ELECTROINFORMATICO: Convierte la luz dispersa en señales eléctricas y las procesa para su análisis.
Sistema optico
El impactode cada célula con el rayo de luz produce señales que corresponden a diferentes parámetros de la célula y que son recogidos por distintos detectores.
PARAMETROS
Características Morfológicas de lacélula : tamaño y complejidad del citoplasma
Características antigenicas de la célula : Inmunofenotipo.
PARAMETROS FISICOS
Su tamaño relativo (forward scatter-FSC)
Su granularidad relativa o...
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